不同月龄人脐带间充质干细胞移植对心肌梗死后梗死面积及梗死区血管新生的影响

摘要

目的:观察移植不同月龄组人脐带间充质干细胞（Human umbilical cord-derivedmesenchymal stem Cells，HUMSCs），对兔急性心肌梗死后梗死面积和梗死区血管新生的影响。
　　 方法:1.P3代HUMSCs培养、爬片，行Brdu标记细胞阳性率检测及HLA-G细胞免疫化学检测。2.健康新西兰大白兔30只，结扎左室支建立兔心肌梗死模型成功后2周，随机数字表法分为小月龄细胞移植组（小月龄组，n=10）、足月龄细胞移植组（足月组，n=10）及对照组(n=10)。3.将小月龄和足月人脐带间充质干细胞分别标记BrdU，多点注射对应实验组心肌梗死的交界区和中心区，对照组注射无血清培养基。细胞移植后4周处死动物，取心脏标本。4.行TTC特殊染色后，以Image-Pro Plus7.0软件测心肌梗死面积;取心肌组织，切片行HE染色、免疫组化检测兔心肌组织中的BrdU示踪细胞及Ⅷ因子染色比较毛细血管密度。
　　 结果:1.HLA-G在来源于小月龄脐带的HUMSCs中高表达，在来源于足月龄新生儿脐带的HUMSCs中低表达。2.移植后4周，小月龄和足月细胞移植组在心肌梗死区均发现有BrdU示踪细胞，在心肌梗死面积比较方面，和对照组(24.29±3.48)％相比，小月龄组(9.77±2.43)％和足月龄组(15.87±1.23)％均明显减少(P＜0.01)，小月龄组较足月龄组减少更为明显(P＜0.05)。3.在毛细血管密度方面，和对照组(34.00±9.22)相比，小月龄组(98.60±9.56)和足月龄组(59.60±6.88)毛细血管密度均明显增加(P＜0.01)，小月龄组较足月龄组增加更为明显(P＜0.05)。
　　 结论:来源于小月龄脐带组织的间充质干细胞能更好促进梗死区血管新生，有潜力成为心肌细胞移植的更理想来源。

目录

声明

英文缩略词表

摘要

前言

1 材料与方法

1．1 主要实验材料

1．2 主要实验试剂及仪器

1．3 实验流程

1．4 实验方法

1．5 主要观察指标

1．6 统计学分析

2 结果

2．1 HUMSCs的培养和标记

2．2 心肌梗死模型的建立

2．2 心肌梗死面积的测定

2．4 心肌组织的HE染色

2．5 移植组中BrdU细胞示踪

2．6 心肌组织毛细血管密度分析

2．7 HLA-G在不同来源HUMSCs中的表达

3 讨论

3．1 实验动物模型的选择

3．2 MSCs的移植方式选择

3．3 HLA-G的表达与HUMSCs移植效果关系的探讨

4 结论

参考文献

综述

致谢

作者简历