我国部分地区几种虫媒病毒感染的流行病学调查研究

摘要

虫媒病毒(Arbovirus)是一类在鸟类、哺乳动物(包括人类)间维持自然循环的蚊媒和蜱媒病毒，其中大多数可导致人畜共患的自然疫源性疾病，感染特征有发热、头痛、脑炎，甚至死亡。我国地域辽阔，生态景观复杂，存在多种虫媒病毒自然疫源地的可能性很大。本研究在我国部分地区开展几种黄病毒和甲病毒感染的流行病学调查研究，旨在了解虫媒病毒在我国的存在情况和潜在媒介蚊种及其自然疫源地性质，为深入开展虫媒病毒的相关研究和大规模疫源地调查奠定基础。 首先，从人群、媒介和宿主三个环节对我国部分地区进行流行病学调查研究。血清流行病学调查表明，我国存在黄病毒和甲病毒的感染，西尼罗病毒(WestNile virus WNV)和乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus JEV)抗体阳性率分别为24.0﹪和22.5﹪，黄病毒抗体阳性率为37.5﹪；基孔肯雅病毒(ChikungunyaVirus CHK)和辛德毕斯病毒(sindbis Virus SIN)抗体阳性率分别为3.9﹪和6.0﹪。黄病毒的感染有明显的地区差异性，南方地区人群黄病毒感染本底高于北方地区(P=0.005)。用间接免疫荧光试验(immunofluorescence assay IFA)对WNV和JEV抗体的检测中，发现两种病毒抗体均为阳性的血清有59份，两者呈现一定的交叉反应；对媒介、宿主的分子流行病学调查中，未发现病毒核酸存在的阳性标本。 应用免疫学与分子生物学技术，建立敏感、特异、可靠的WNV IgG抗体的酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay ELISA)检测方法，为在宿主动物和人群中开展WNV感染的筛选和血清流行病学本底调查提供技术支持。WNV E蛋白是其主要抗原性结构蛋白，具有血凝素活性，能够诱导机体产生中和抗体。本研究利用筛选的WNV包膜蛋白重组质粒阳性E．coli．M15株，表达纯化了E蛋白。经Western blotting检测，E蛋白能够与小鼠WNV阳性血清发生特异性抗原抗体反应。从而以此为抗原建立检测WNV抗体的ELISA方法，对检测条件进行优化，并对其灵敏度、特异度和重复性进行了评价。结果表明，本方法最适抗原包被量为0.034μg，酶标抗体和血清稀释度分别为1∶4800和1∶80；且该方法重复性好，检测抗体灵敏、特异。更重要的是，在对48份JEV抗体阳性血清检测中，其灵敏度和特异度分别为86.8﹪和93.8﹪，能够区分WNV和JEV感染。进一步利用ELISA方法对人血清wNV抗体进行检测，结果与IFA检测的阳性符合率和阴性符合率分别为42.3﹪和80.6﹪，总符合率为71.5﹪，更加提示WNV自然疫源地存在的可能性。综上所述，本研究通过对几种虫媒病毒感染的流行病学调查研究，可以发现我国存在黄病毒和甲病毒的感染，且黄病毒的感染有地区差异性；但未能在媒介和宿主动物标本中发现病原体存在的直接证据，需要开展更加广泛、深入的研究。同时，利用WNv E蛋白作抗原建立的ELISA方法，重复性好，灵敏度高，检测抗体特异，在WNv的血清流行病学调查中有重要的应用价值；并为其他虫媒病毒抗体检测方法的建立提供借鉴。

目录

文摘

英文文摘

声明

前 言

第一部分:我国部分地区几种虫媒病毒感染的血清流行病学调查研究

前言

1、对象、材料与方法

2、结果

3、讨论

第二部分:我国部分地区几种虫媒病毒感染的分子流行病学调查研究

前言

1、对象、材料与方法

2、结果

3、讨论

第三部分酶联免疫吸附试验检测西尼罗病毒抗体方法的建立及初步应用

前言

1、材料与方法

2、结果

3、讨论

结论

参考文献

缩略语

西尼罗病毒研究进展

硕士期间发表的文章

致 谢