川芎嗪和葛根素配伍对大鼠局灶性脑缺血后神经细胞凋亡及Cyt-c、caspase-3表达的影响

摘要

目的：研究川芎嗪和葛根素配伍对大鼠局灶性脑缺血后神经细胞凋亡及Cyt-C、caspase-3表达的影响，探讨川芎嗪和葛根素配伍对脑缺血损伤的保护作用。
　　方法：选用清洁级健康SD大鼠60只，按数字随机分为5组：假手术组、模型组、川芎嗪+葛根素低剂量组、川芎嗪+葛根素中剂量组、川芎嗪+葛根素高剂量组，每组12只。采用线栓法制作大鼠中动脉闭塞局灶性脑缺血模型，在造模成功后0、6 h时点分别予腹腔注射注入相应药物。其中，川芎嗪+葛根素低剂量组注入川芎嗪20 mg/kg+葛根素20mg/kg，川芎嗪+葛根素中剂量组注入川芎嗪50mg/kg+葛根素50mg/kg，川芎嗪+葛根素高剂量组注入川芎嗪80mg/kg+葛根素80mg/kg。实验动物于缺血后24h进行神经功能评分，HE染色观察梗死病理学改变，Tunnel染色检测神经细胞凋亡，Western blot技术检测Cyt-C、Caspase-3表达水平。
　　结果：
　　1.神经功能评分：假手术组神经功能评分为(0.17±0.41)，模型组为(3.87±0.52)，川芎嗪+葛根素低剂量组为(2.91±0.41)，川芎嗪+葛根素中剂量组为(2.03±0.41)，川芎嗪+葛根素高剂量组为(1.17±0.52)；与假手术组相比较，模型组神经功能评分显著增加；与模型组相比，川芎嗪+葛根素低、中、高剂量组的神经功能评分显著减少；且随着剂量的增加，其神经功能评分减少越加显著。
　　2.HE染色脑组织病理学变化：假手术组中未见梗死改变，神经细胞形态正常，胞膜、核膜清晰，核仁明显；模型组及川芎嗪+葛根素低、中、高剂量组可见稳定梗死灶，皮质梗死中心区神经细胞脱失明显，残存细胞多无完整的细胞结构，细胞核固缩深染，核仁消失。梗死区周围神经细胞数目减少，且肿胀、坏死、脱失，分布不均匀，细胞周围及间隙增宽，水肿明显。川芎嗪+葛根素低、中、高剂量组梗死灶中心神经细胞脱失亦较明显，较缺血再灌注组无明显差别，缺血半暗带内细胞形态较缺血组规则，脑组织损害程度明显减轻，且随着剂量的增加，其脑组织损害程度减轻更为明显。
　　3.Tunnel染色及光镜下凋亡细胞计数：假手术组凋亡细胞数为（0.91±0.65），模型组为（17.98±1.01），川芎嗪+葛根素低剂量组为（15.72±1.85），川芎嗪+葛根素中剂量组为（13.22±1.35），川芎嗪+葛根素高剂量组为（11.12±1.12）。与假手术组相比，模型组凋亡细胞明显增多；与模型组比较，川芎嗪+葛根素低、中、高剂量组的凋亡细胞计数明显减少，且随着剂量的增加，凋亡细胞计数减少更为显著。
　　4.Western blot检测Cyt-C、caspase-3蛋白表达：假手术组的Cyt-C、caspase-3蛋白表达量分别为(1.22±0.82)、（2.14±0.14），模型组为(4.58±0.63)、(13.82±0.27)，川芎嗪+葛根素低剂量组为(3.46±0.10)、(8.97±0.33)，川芎嗪+葛根素中剂量组为(2.57±0.53)、(6.63±0.62)，川芎嗪+葛根素高剂量组为(1.49±0.12)、(5.10±0.36)。与假手术组相比较，模型组的Cyt-C、caspase-3蛋白表达明显增高；与模型组相比,川芎嗪+葛根素低、中、高剂量组的Cyt-C、caspase-3蛋白表达均显著减少；且随着剂量的增加，Cyt-C、caspase-3蛋白表达减少越加显著。
　　结论：
　　1、川芎嗪和葛根素配伍对脑缺血损伤具有明显的保护作用。
　　2、川芎嗪和葛根素配伍对脑缺血损伤的保护作用存在量效关系。
　　3、川芎嗪和葛根素配伍可能通过下调 Cyt-C、caspase-3表达，减少细胞凋亡而发挥对脑缺血损伤的保护作用。

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前言

1 材料与方法

1.1 主要实验材料

1.2 主要实验试剂

1.2 其它材料

1.3 主要实验仪器

1.5 实验方法

2.结果

2 .1 各组大鼠神经功能评分

2.3 HE染色脑组织病理学改变

2 .4 凋亡阳性神经元细胞的变化

2 . 5 脑梗死缺血半暗带皮质区Cyt-C、Caspas e-3表达情况

3 讨论

3.1脑缺血损伤后Cyt-C和caspase-3表达及其意义

3 .2川芎嗪和葛根素配伍对脑缺血损伤的保护作用及量效关系

3 .3川芎嗪和葛根素配伍对脑缺血损伤保护作用的潜在机制

4 结论

参考文献

综述: 葛根素和川芎嗪配伍治疗缺血性脑卒中的进展

致谢

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