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河西走廊地区嗜盐菌分类学研究

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第一章 前言

1极端微生物的发现及其研究意义

2嗜盐微生物

2.1嗜盐微生物的分布

2.2嗜盐微生物的分类

2.3嗜盐微生物的耐盐机制

2.4嗜盐微生物的应用前景

2.5中度嗜盐菌的组成

3细菌的多相分类学

3.1三域学说

3.2细菌分类学

3.3细菌多相分类学内容

4未知嗜盐菌分类鉴定的基本程序及其遵循的原则

4.1未知嗜盐菌分类鉴定的基本程序

4.2对微生物进行新种分类时通常遵循的原则

5立题依据

第二章 材料与方法

1样品的采集

2菌株的分离与纯化

2.1分离培养基

2.2菌株分离与纯化

3菌株的保藏

4参比菌

5表型特征

5.1形态学特征

5.2生理学特征

5.3生化和酶学特征

6基因型特征

6.1 16S rDNA序列测定

6.2系统发育学研究

第三章 结果与分析

1样品采集结果

2菌株分离

3形态学特征

4生理学特征

4.1菌株耐盐度的测定

4.2 Mg2+对菌株的影响

4.3生长pH测定

5生化和酶学特征

5.1酶学特征

5.2其它生理生化特性

5.3唯一碳源利用

5.4抗生素敏感试验

6菌株的16S rRNA基因序列系统发育树

7菌株描述

参考文献

附录

致谢

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摘要

我们从甘肃河西走廊地区的高盐环境采集到样品,进行嗜盐微生物的分离和多相分类学研究。并对分离到的嗜盐菌菌株进行形态特征、培养特征观察和生理生化性质的测定,以及16S rRNA序列分析等多项分类技术对其进行系统的分类研究。 采用分离用固体培养基对样品中的嗜盐微生物进行分离和筛选,先后两次共得到28个菌株,并对其中4个菌株做了更深入的研究。其中海球菌属(Marinococcus)的三个菌株DH1、DH3、AF2均为革兰氏阳性球菌,好氧,有鞭毛,能运动,无内生孢子,最适生长温度为28℃,最适盐度为8%,过氧化氢酶阳性,氧化酶、脲酶、酯酶阴性,并且均不能水解淀粉、干酪素和明胶。AF2不能在没有NaCl的条件下生长,DH1和DH3可以;AF2的硝酸盐还原反应为阳性,DH1和DH3的为阴性;DHI在没有Mg2+的条件下活力受到明显的影响,DH3在Mg2+不存在的情况下活力受到轻微的影响,AF2则对Mg2+不敏感;三者在碳源利用和抗生素实验中也有较明显的差别。Lentibacillus属的菌株AK5为革兰氏阳性杆菌,大小为0.5-0.7×1.5-3.0μm,有鞭毛,能运动,不产芽孢,好氧,最适生长温度为37℃,生长NaCl浓度范围为0%-15%,过氧化氢酶和脲酶阳性,氧化酶阴性,能够水解淀粉和明胶,不能水解干酪素和纤维素,硝酸盐还原、甲基红实验及VP实验阳性,不产生H2S和吲哚,对四环素、氯霉素、青霉素、利福平敏感,不能以果糖、蔗糖、肌糖、乙酰胺和糊精作为唯一碳源,不能利用果糖产酸。 通过16S rRNA系统发育分析及生理生化特性的比较,菌株DH1、DH3、AF2可能为海球菌属潜在的新种,菌株AK5可能为Lentibacillus属潜在的新种。

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