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芹菜素对雄性小鼠生殖系统影响的研究

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技术路线

前 言

第一部分 芹菜素腹腔注射实验

1材料和方法

2结果

3讨论

第二部分 芹菜素灌胃实验

1材料与方法

2结果

3讨论

结 论

参考文献

附 录

攻读硕士学位期间发表论文目录

致 谢

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摘要

目的:探讨芹菜素对雄性小鼠生殖系统的影响,为芹菜素的进一步开发利用提供一定的线索。
   方法:(1)成年健康SPF级昆明种雄性小鼠84只,按体重随机分为7组:阴性对照组、溶剂对照组及5个芹菜素剂量组,每组12只,每天定时分别给予阴性对照组以0.4ml生理盐水腹腔注射,溶剂对照组0.5%二甲基亚砜(DMSO)腹腔注射0.4ml,芹菜素各组分别给予5mg/kg、10mg/kg、15mg/kg、20mg/kg、25mg/kg的芹菜素溶液腹腔注射,连续7d,实验结束,称重,处死小鼠,取材。(2)成年健康SPF级昆明种雄性小鼠100只,按体重随机分成5个剂量组(阴性对照组、溶剂对照组及芹菜素84mg/kg、168mg/kg和252mg/kg组),各剂量组又随机分成7d和14d组,每组10只。每天定时灌胃,7d处理组和14d处理组分别连续灌胃7d和14d,在灌胃第35d,称重,处死小鼠,取材。(3)观察指标:①分离肝脏、脾脏、肾脏、睾丸和附睾,分别称重并计算脏器系数;②应用计算机辅助精液分析技术(CASA)检测小鼠精子运动参数;③伊红染色显微镜下观察精子畸变数;④放射免疫法检测血清睾酮(T)、促卵泡激素(FSH)和促黄体生成素(LH)水平;⑤测定血红蛋白含量:⑥测定血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、ALT/AST、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)、A/G、碱性磷酸酶(ALP)、血清γ-谷氨酰转肽酶(GGT)的含量;⑦应用流式细胞术检测睾丸生精细胞DNA含量及细胞周期的变化;⑧光镜下观察睾丸组织形态学改变,透射电镜下观察睾丸超微结构变化。
   结果:(1)腹腔注射:与阴性对照组比较,芹菜素5mg/kg组ALP、A/G升高,GLO、ALT/AST、TG降低;芹菜素5mg/kg组1C的含量明显增多,芹菜素5mg/kg组1C/4C比例明显增加;芹菜素25mg/kg组精子密度明显降低。(2)灌胃实验:与阴性对照组比较,芹菜素7d灌胃168mg/kg组肾脏系数及84mg/kg、252mg/kg组脾脏系数有所降低;各剂量组TG明显降低;芹菜素168mg/kg组、252mg/kg组AKP及LDH均降低。芹菜素14d灌胃168mg/kg组GGT明显升高;84mg/kg组、252mg/kg组1C:2C比值升高;252mg/kg组VAP、VSL、STR、WOB、b级精子所占比例及精子活力降低,BCF增高,且随着灌胃时间的延长,各组小鼠的精子密度与精子活力与同期阴性对照组比较明显降低;84mg/kg、252mg/kg组AKP增高,168mg/kg、252mg/kg组ACP及LDH明显降低。组织学观察:芹菜素灌胃处理组小鼠睾丸的组织结构受到了不同程度的破坏,随着染毒剂量的增加及时间的延长,睾丸中的曲精小管、间质细胞受损程度也略有增重,精母细胞、初级精母细胞、次级精母细胞的形态和精子的数量也有所改变。
   结论:芹菜素对小鼠的肝脏功能、精子运动参数及睾丸细胞周期、组织结构、组织酶活性有一定的影响,但致畸作用不明显。

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