TLR2配体肽聚糖对人骨髓间充质干细胞增殖和分化为脂肪细胞及成骨细胞的影响

摘要

目的:研究Toll样受体2(TLR2)的配体肽聚糖(PGN)在体外对人骨髓间充质干细胞(BM-MSC)增殖和分化为脂肪细胞和成骨细胞的影响。
　　 方法:Ficoll法分离培养健康供体的BM-MSC；用流式细胞仪(FCM)检测BM-MSC中CD34、CD45、HIA-DR、CD44和CD71的表达；MTT法检测PGN对BM-MSC增殖的影响，并绘制生长曲线；流式细胞仪检测PGN对BM-MSC细胞周期的影响；成脂、成骨诱导条件下，观察PGN对BM-MSC定向分化的影响。
　　 结果:流式细胞术结果显示：BM-MSC高表达CD44、CD71，而CD45、CD34HLA-DR呈阴性表达。BM-MSC与PGN共培养后，BM-MSCs的增殖指数明显增加，各浓度组PGN的组内比较，以10ug/ml最明显，10ug/ml、20ug/ml相比较无明显差异；与对照组比较，PGN干预组G0/G1期比例降低，S期和G2/M期细胞比例增加，结果与MTT相一致；成脂细胞诱导条件下的BM-MSC，第14、21天细胞成脂率计数结果分别为65.5％±5.3％、85.2％±3.4％。而实验组为32.2％±4.8％、42.3％±3.4％。成骨诱导条件下的BM-MSC，诱导第7日即有碱性磷酸酶(ALP)表达，细胞矿化结节于诱导第10天出现，于诱导第14、21日行茜素红染色显示，分别70.5％±3.5％、87.5％±3.5％，形成小片状矿化结节；与对照组相比，实验组矿化结节出现时间较晚，于诱导于诱导第14、21日行茜素红染色显示，分别42.5％±6.5％、60.5％±3.5％形成小片状矿化结节，经统计学分析，两组具有显著差异。
　　 结论：在培养条件下PGN对BM-MSC增殖有促进作用，促进BM-MSC进入S期和G2/M，从而有更多的细胞分裂，产生大量的增殖细胞；TLR2配体PGN抑制BM-MSC定向分化为脂肪细胞和成骨细胞。

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Toll样受体2的研究进展

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