阻断AT1受体后自发性高血压大鼠肾脏AQP3和AQP4表达的变化

摘要

目的：观察12周龄自发性高血压大鼠用缬沙坦灌胃后血压的变化及肾脏中水通道蛋白3、4表达的变化，探讨缬沙坦阻断AT1受体后对自发性高血压大鼠鼠肾脏水通道蛋白3、4表达的影响。为新型抗高血压药的研发提供可能的作用靶点。
　　方法：将11周龄自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rats，SHR）和Wistar Kyoto（WKY）大鼠各12只，随机分为4组，分别为：SHR缬沙坦灌胃组（SHR-V）、SHR生理盐水灌胃组（SHR-N）、WKY大鼠缬沙坦灌胃组（WKY-V）、WKY大鼠生理盐水灌胃组（WKY-N），每组各6只。适应性喂养1周后，固定时间段采用鼠尾动脉无创测量系统测量血压，每只大鼠测量三次，取平均值。对SHR-V组和WKY-V组大鼠分别进行缬沙坦10mg(kg/day)灌胃，同等体积的生理盐水对 SHR-N组和WKY-N组大鼠进行灌胃，随着实验时间增至28周，期间根据每周大鼠体重变化情况调整灌胃药物剂量。灌胃28周后，分别取大鼠腹主动脉血测醛固酮值；取肾组织，实时荧光定量反转录聚合酶链反应(Real-time quantitative polymerase chain，RT-PCR)方法测定其 AQP3 mRNA、AQP4 mRNA的表达；用免疫组织化学（Immunohistochemistry，IHC）法检测 AQP3、AQP4蛋白定位表达；免疫印迹法（Western blotting，WB）检测AQP3、AQP4蛋白定量表达，对上述指标的结果统计分析。
　　结果：⑴WKY-N组和WKY-V组大鼠血压值无明显差异（P>0.05）；与SHR-N组相比，SHR-V组血压控制较好，随着实验时间的延长未见血压升高，两组血压值比较有统计学意义（P<0.05）；SHR-N组的血压值随实验周数的增加呈明显升高趋势，灌胃28周时均高于其它对照组，差别具有统计学意义（P<0.05）。⑵血浆醛固酮值结果：SHR-V组醛固酮水平与WKY-N组、WKY-V组比较，醛固酮水平显著性增高（P<0.05）；SHR-N组醛固酮水平高于WKY-N组、WKY-V组（P<0.05），差异具有统计学意义；SHR-V组醛固酮水平与SHR-N组比较，醛固酮升高水平增高（P<0.05），差异具有统计学意义。⑶免疫组织化学结果：与 WKY-N组、WKY-V组、SHR-V组比较，AQP3在SHR-N组中表达量最少，差异有统计学意义（P<0.05）；AQP3在SHR-V组表达高于SHR-N组，差异有统计学意义（P<0.05）。WKY-N和WKY-V组大鼠肾脏AQP4蛋白表达量较SHR-N组、SHR-V组明显升高，差异有统计学意义（P<0.05）；AQP4在SHR-V组表达高于SHR-N组，差异有统计学意义（P<0.05）。⑷RT-PCR方法测定结果：SHR-V组大鼠肾脏中的AQP3 mRNA、AQP4 mRNA含量表达水平显著高于其他三组表达（P<0.05），差异具有统计学意义；SHR-N组大鼠AQP3 mRNA、AQP4 mRNA含量表达水平明显高于WKY-N组、WKY-V组（P<0.05），差异具有统计学意义。⑸免疫印迹法结果：AQP3、AQP4蛋白在SHR-V组大鼠肾脏中的表达水平明显高于SHR-N组大鼠肾脏中AQP3蛋白表达（P<0.05），差异具有统计学意义；AQP3、AQP4蛋白在WKY-N组大鼠肾脏中的表达与WKY-V组大鼠肾脏中的AQP3蛋白表达无明显差异（P>0.05），差异不具有统计学意义；SHR-N组大鼠肾脏中AQP3、AQP4的蛋白表达低于WKY-N组、WKY-V组大鼠肾脏蛋白（P<0.05），差异具有统计学意义。
　　结论：①阻断AT1受体对自发性高血压大鼠血压控制效果较好，同时可反馈性提升血浆中醛固酮水平，增加对机体体液平衡的调节，进而改善血压。②阻断AT1受体可促使SHR大鼠肾脏AQP3、AQP4mRNA和蛋白的表达增多，从而增加机体对水分调节降低血压。

目录

声明

中英文缩略词表

前言

1 材料与方法

1.1 主要实验仪器

1.2 主要实验试剂

1.3 实验方法

1.4 统计学处理

2 结果

2.1 各组大鼠的一般情况及血压检测结果

2.2 各组大鼠血醛固酮含量的检测结果

2.3 各组大鼠肾脏病理形态学变化

2.4 免疫组化染色检测各组大鼠肾脏AQP3、AQP4蛋白表达结果

2.5 RT-PCR检测各组大鼠肾脏中AQP3、AQP4 mRNA结果

2.6 Western blot检测AQP3、AQP4蛋白在各组大鼠肾脏中含量结果

3 讨论

3.1 阻断AT1受体后血压值的变化

3.2 阻断AT1受体后血浆醛固酮的变化

3.3 阻断AT1受体后肾脏AQP3、AQP4表达的变化

3.4 展望

4 结论

参考文献

综述:肾内血管紧张素Ⅱ与高血压

致谢

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