金钗石斛总生物碱对APP/PS1转基因小鼠学习记忆影响及其相关因素研究

摘要

目的：观察金钗石斛总生物碱对APP/PS1双转基因小鼠学习记忆功能的影响。
　　方法：将7月龄雄性APP/PS1转基因小鼠24只随机均分为两组：APP/PS1组（APP/PS1+vehicle），APP/PS1给药组（APP/PS1+DNLA）；同性别同月龄同窝野生型（WT）小鼠24只随机均分为两组：正常对照组（WT+vehicle），正常给药组（WT+DNLA）。APP/PS1给药组、正常给药组每日一次灌胃金钗石斛生物总碱40 mg/kg，正常对照组、APP/PS1组灌胃给予等体积生理盐水（NS），连续6个月。Morris水迷宫检测小鼠空间学习记忆能力。行为学检测结束后，麻醉小鼠，取材，硫磺素-S染色法检测小鼠皮质区老年斑；尼氏染色法检测小鼠海马神经元存活情况；电镜观察海马神经元-突触结构的改变；ELISA检测小鼠血清中IL-1β的含量；Western blot法检测小鼠海马Aβ1-40、Aβ1-42含量和GFAP、IL-6、COX-2、p-NF-κB、p-p38、SYP、PSD-95蛋白的表达。
　　结果：⑴与正常对照组小鼠相比，APP/PS1组逃避潜伏期（escape latency）明显延长，穿越原平台次数显著减少、原平台象限游泳距离百分比明显下降、原平台象限游泳时间显著缩短；大脑皮质区老年斑大量形成；海马CA1区细胞出现深染固缩现象且尼氏体数量减少；海马中神经细胞形态破坏，突触密度降低且不均一，突触间隙模糊不清。Aβ1-40、Aβ1-42含量明显增加；GFAP、IL-6、COX-2、p-NF-κB、p-p38蛋白表达明显增加；SYP、PSD-95蛋白表达明显降低。⑵正常给药组较正常对照组小鼠上述指标没有明显差异。⑶APP/PS1给药组较APP/PS1组逃避潜伏期明显缩短，穿越原平台次数显著增加、原平台象限游泳距离百分比明显上升、原平台象限游泳时间显著延长；大脑皮质区老年斑数量明显减少且多为小体积；海马CA1区细胞深染固缩现象减少且尼氏体数目增多；海马中神经元-突触结构基本正常，突触前后膜厚薄程度一致，突触前膜内突触囊泡清晰，规则；海马和大脑皮质中Aβ1-40、Aβ1-42含量明显降低；GFAP、IL-6、COX-2、p-NF-κB、p-p38蛋白表达明显降低；SYP、PSD-95蛋白表达明显升高。
　　结论：在本实验条件下，DNLA能减轻APP/PS1转基因小鼠学习记忆减退作用，减少老年斑的数量及阻遏存活神经元数量减少，其机制可能与减少Aβ水平、抑制星形胶质细胞的激活、抑制NF-κB和p38活化和上调PSD-95、SYP表达有关。

目录

声明

中英文缩略词表

前言

1 材料与方法

1.1 主要实验材料

1.2 主要仪器

1.3 实验方法

1.4 统计学分析

2 结果

2.1 DNLA对APP/PS1转基因小鼠空间学习记忆功能的影响

2.2 DNLA对APP/PS1转基因小鼠大脑皮层老年斑的影响

2.3 DNLA对APP/PS1转基因小鼠海马和皮质神经元形态的影响

2.4 电子透视显微镜观察DNLA对APP/PS1转基因小鼠海马神经元-突触结构的改变

2.5 DNLA对APP/PS1转基因小鼠海马Aβ1-40 、Aβ1-42含量的影响

2.6 DNLA对APP/PS1转基因小鼠海马星形胶质细胞活化标志物GFAP的影响

2.7 DNLA对APP/PS1转基因小鼠血清中IL-1β的影响

2.8 DNLA对APP/PS1转基因小鼠海马炎症因子COX-2、IL-6的影响

2.9 DNLA对APP/PS1转基因小鼠海马NF-κB和p38的影响

2.10 DNLA 对APP/PS1转基因小鼠PSD-95和SYP的影响

3 讨论

4 结论

参考文献

综述:ApoE4在阿尔茨海默病中的研究进展

致谢

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