CSF1R的抑制剂Ki20227对全脑缺血小鼠小胶质细胞和神经元的影响

摘要

脑中风严重危害人类的生命健康。缺血性脑中风指由各种原因所致的大脑血流供应障碍，从而导致神经元、胶质细胞以及周围血管因局灶性脑缺血而受损的急性脑血管事件的一种类型，相应的神经功能缺损包括偏瘫、失语、认知和学习能力受损等。目前中风治疗方法主要是通过多种机制来提高神经环路的可塑性或者修复神经环路，新的方法需要关注在组织修复过程中多种细胞之间相互联系的复杂性和细胞的存活途径。中风后，小胶质细胞，血管内皮细胞以及一些其他诱导因素共同协调参与组织损伤和修复。小胶质细胞是脑内具有免疫活性的细胞，在不同的生理病理条件下具有多种多样的功能。脑中风后，小胶质细胞迅速反应，目前对脑中风后小胶质细胞的功能还有很大争议。小胶质细胞对神经元具有两种作用：积极作用和消极作用，但在中风后，小胶质细胞的作用还不是很清楚，同时小胶质细胞增生的调控机制也尚不清楚。本研究探讨中风后Ki20227对小胶质细胞和神经元的影响，以及中风后小胶质细胞是否对神经元具有保护作用。
　　本论文利用小胶质细胞特异性表达绿色荧光蛋白的转基因小鼠，采用药物Ki20227抑制CSF1R来干预小胶质细胞，通过建立全脑缺血脑中风模型，利用双光子活体成像技术，免疫组织化学染色，荧光显微成像分析，荧光定量PCR和行为学测试等研究方法，揭示中风后小胶质细胞对神经元的影响，初步探索小胶质细胞增生的调控机制。我们的结果表明，中风后BrdU染色显示小胶质细胞存在增殖现象，中风导致小胶质细胞中细胞因子表达异常；神经元数目减少；皮层和海马树突棘密度下降；行为学异常。同时发现全脑缺血后采用药物Ki20227抑制CSF1R后，一方面导致了小胶质细胞密度下降、突起减少、相关细胞因子表达异常，同时增殖的小胶质细胞密度下降，而另一方面进一步导致了树突棘密度的下降，突触分子表达水平下降，以及行为学异常。综上，我们的结果揭示了小胶质细胞的形态和细胞群密度以及相关细胞因子的表达与CSF1R密切相关；小胶质细胞在全脑缺血后对神经元具有保护作用。

目录

声明

第一章 绪论

1.1 中风的病理学机制以及临床治疗

1.2小胶质细胞的研究

1.3 小胶质细胞的受体

1.4 小胶质细胞增殖

1.5 小胶质细胞对神经元的作用

1.6 突触与中风的关系

1.7 小胶质细胞在中风中的作用

1.8 本实验的研究目的和意义

第二章 材料和方法

2.1 实验材料

2.2 方法

第三章 结果

3.1 Ki20227对正常小鼠小胶质细胞的影响

3.2 中风模型的建立

3.3 Ki20227对中风小鼠大脑皮层小胶质细胞形态的影响

3.4 Ki20227干预对缺血性脑中风小鼠大脑皮层神经元的影响

3.5 Ki20227干预对缺血性脑中风小鼠脑神经元突触分子表达的影响

3.6 Ki20227干预对中风小鼠行为的影响

第四章 讨论

4.1 抑制CSF1R对小胶质细胞的影响

4.2 抑制CSF1R后对神经元的影响

4.3 中风及药物干预对小胶质细胞相关因子的影响

4.4 抑制CSF1R后突触分子表达量降低

4.5 抑制CSF1R对中风后行为的影响

第五章 结论

参考文献

附录 缩略词表

在学期间的研究成果

致谢