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代乳粉饲喂量对羔羊生产性能和免疫功能的影响及机理研究

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第一章 文献综述

1.1 羔羊早期营养的重要性

1.1.1 羔羊早期断奶

1.1.2 代乳粉对幼龄反刍动物生长发育的影响

1.1.3 断奶应激对幼龄反刍动物免疫功能的影响

1.2 代乳粉对幼龄反刍动物生长性能和养分消化的影响

1.2.1 代乳粉对幼龄反刍动物生长性能的影响

1.2.2 代乳粉对幼龄反刍动物营养物质消化的影响

1.3 代乳粉对幼龄反刍动物胃肠道发育和微生物区系的影响

1.3.1 代乳粉对幼龄反刍动物瘤胃发育和微生物区系的影响

1.3.2 代乳粉对幼龄反刍动物肠道发育和微生物区系的影响

1.4 断奶应激影响幼龄反刍动物免疫功能的机理

1.4.1 断奶应激对细胞因子分泌的影响

1.4.2 断奶应激对中性粒细胞数和淋巴细胞数的影响

1.4.3 断奶应激对单核细胞数的影响

1.4.4 断奶应激中红细胞和血小板参与的免疫反应

1.4.5 断奶应激对血浆葡萄糖和胰岛素浓度的影响

1.4.6 断奶应激对急性期蛋白的影响

1.5 断奶应激中糖皮质激素对免疫功能的调节机理

1.5.1 糖皮质激素受体的表达

1.5.2 糖皮质激素对免疫细胞的调控

1.5.3 糖皮质激素对促炎性细胞因子的抑制

1.5.4 糖皮质激素的致炎作用

1.5.5 糖皮质激素对细胞凋亡的调控

1.6 本研究的目的、意义和内容

1.6.1 研究的目的和意义

1.6.2 研究内容

1.6.3 技术路线

第二章 代乳粉饲喂量和断奶日龄对羔羊生产性能和瘤胃功能的影响

2.1 前言

2.2 材料和方法

2.2.1 试验设计

2.2.2 试验动物饲养管理

2.2.3 生产性能测定

2.2.4 样品采集

2.2.5 营养物质消化率测定

2.2.6 瘤胃组织形态学

2.2.7 瘤胃发酵参数和酶活性测定

2.2.8 微生物DNA提取

2.2.916S rRNA基因测序

2.2.10 数据统计与分析

2.3 结果与分析

2.3.1 代乳粉饲喂对羔羊生长性能的影响

2.3.2代乳粉饲喂对羔羊养分消化率的影响

2.3.3 代乳粉饲喂对羔羊瘤胃组织形态学、发酵参数和酶活性的影响

2.3.4瘤胃微生物16S rRNA基因测序质量和Alpha多样性

2.3.5 Beta多样性分析

2.3.6 代乳粉对羔羊瘤胃微生物组成的影响

2.4 讨论

2.5 小结

第三章 代乳粉饲喂量对小肠形态学和功能的影响

3.1 前言

3.2 材料和方法

3.2.1 试验设计

3.2.2 试验动物和饲养管理

3.2.3 样品采集

3.2.4 肠道组织形态学和消化酶活性分析

3.2.5 肠道组织RNA提取和反转录

3.2.6 荧光定量PCR验证

3.2.7 转录组测序

3.2.8 测序下机数据处理及质控

3.2.9 参考基因组比对和差异基因功能分析

3.2.10 数据统计分析

3.3 结果与分析

3.3.1 空肠组织形态学和消化酶活性

3.3.2 测序序列统计及参考基因组比对

3.3.3 基因总体表达水平分析

3.3.4 差异表达基因分析与荧光定量PCR验证

3.3.5 基因模块与表型相关性分析

3.3.6 差异表达基因富集分析

3.4 讨论

3.5 小结

第四章 断奶应激影响幼龄反刍动物免疫功能的Meta分析

4.1 前言

4.2 材料和方法

4.2.1 文献检索

4.2.2 文献筛选

4.2.3 数据提取

4.2.4 数据特征

4.2.5 统计方法

4.3 结果与分析

4.3.1 断奶后血液中白细胞总数的Meta分析

4.3.2 断奶后血液中中性粒细胞数的Meta分析

4.3.3 断奶后血液中淋巴细胞数的Meta分析

4.3.4 断奶后血液中单核细胞数的Meta分析

4.3.5 断奶后血液中皮质醇浓度的Meta分析

4.3.6 断奶前后血液中触珠蛋白浓度的Meta分析

4.3.7 断奶后血液中纤维蛋白原浓度的Meta分析

4.3.8 敏感性分析

4.3.9 发表偏倚

4.4 讨论

4.5 小结

第五章 代乳粉饲喂量对羔羊免疫功能的影响

5.1 前言

5.2 材料和方法

5.2.1 试验设计

5.2.2 试验动物及饲养管理

5.2.3 样品采集

5.2.4 血液学分析

5.2.5 血液中激素、急性期蛋白和TNFα浓度分析

5.2.6 RNA提取和反转录

5.2.7 荧光定量PCR

5.2.8 数据统计与分析

5.3 结果与分析

5.3.1 代乳粉饲喂量对血浆中激素、触珠蛋白和TNFα的影响

5.3.2 代乳粉饲喂量对血细胞的影响

5.3.3 代乳粉饲喂量对血液中细胞因子基因表达的影响

5.3.4 主成分分析结果

5.4 讨论

5.5 小结

第六章 代乳粉饲喂量对羔羊小肠炎症反应和微生物区系的影响

6.1 前言

6.2 材料和方法

6.2.1 试验设计

6.2.2 试验动物和饲养管理

6.2.3 样品采集

6.2.4 空肠组织形态学

6.2.5 肠道组织总RNA提取及cDNA反转录

6.2.6 荧光定量PCR

6.2.7微生物DNA提取和16S rRNA基因测序和分析

6.2.8 数据统计与分析

6.3 结果与分析

6.3.1空肠组织形态学和细胞因子基因表达分析

6.3.2 空肠粘膜和食糜微生物Alpha多样性分析

6.3.3 空肠粘膜和食糜微生物Beta多样性分析

6.3.4 相关性分析结果

6.4 讨论

6.5 小结

第七章 结论

7.1 主要结论

7.2 创新点

7.3 研究展望

参考文献

在学期间的研究成果

一、发表论文

二、参与课题

致谢

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