嗜水气单胞菌的蛋白质组学研究

摘要

论文采用蛋白质组学方法对水产养殖动物的重要致病菌——嗜水气单胞菌的分子解剖图谱、免疫原性蛋白、与传代和耐药有关的功能蛋白质组学进行较系统的研究. 实验首先初步构建了一张嗜水气单胞菌总蛋白质的分子解剖图谱,通过对124个蛋白质的肽质量指纹图谱分析,鉴定了40个蛋白质,其中17个为嗜水气单胞菌的蛋白.分子解剖图谱的构建为进一步的研究提供了基础. 采用2-DE与Western-blot相结合,对嗜水气单胞菌的鼠免疫原性蛋白进行分析,鉴定了5个免疫原性蛋白.它们是:Flagellin FlgB,hypothetical protein,exopolyphosphatase,groEL,EF-G2.其中groEL与EF在其他病原菌的抗血清中也存在抗体.对这些保守抗原的深入研究有利于新疫苗的研制. 最后从胞膜、胞浆和碱性蛋白3个亚蛋白质组学角度,对嗜水气单胞菌的传代机制和耐药变化机制进行了研究.攻毒实验和2-DE的结果均表明在传代过程中一些毒力相关的因子随着传代的进行而逐渐消失.嗜水气单胞菌可能通过3种机制对抗生素产生抗药性.这3种机制可能是:1.通过物质转运泵将抗生素排出菌体外.2.通过感受子感受外界信息,从而调节细菌的生理活动来适应外界的抗生素环境,3.通过一些与转录有关一些因子的表达变化来调节细菌的基因表达. 以上研究将对嗜水气单胞菌引起的疾病的防治起到积极的作用.

目录

文摘

英文文摘

前言

蛋白质组学的产生背景

蛋白质组学研究的主要手段

蛋白质组学研究内容及前景

微生物蛋白质组学研究进展

嗜水气单胞菌研究与本论文研究内容及其意义

本论文研究内容及其意义

材料与方法

结果

嗜水气单胞菌生长曲线的测定

嗜水气单胞菌蛋白质分子解剖图谱的建立

嗜水气单胞菌免疫原性蛋白分析与鉴定

与传代有关的功能蛋白质组学研究

与嗜水气单胞菌耐药性有关的功能蛋白质组学研究

讨论

嗜水气单胞菌分子解剖图谱的初步构建

嗜水气单胞菌免疫原性蛋白的确定

嗜水气单胞菌的传代生理研究

嗜水气单胞菌的抗药性筛选实验

关于实验的其他问题的的讨论

小结

参考文献

致谢

附录