苗药双肾草化学成分及其多糖体液免疫调节作用的研究

摘要

本论文由五章组成。第一章论述了运用三种方法提取苗药双肾草挥发油化学成分的比较研究。第二章详述了双肾草化学成分的研究。第三章为对双肾草多糖进行提取，并进行了含量测定。第四章将提取的双肾草多糖对正常小鼠进行毒理学及免疫药理学试验。第五章是文献研究。本文对双肾草的化学成分及药理活性进行了初步的研究，结果如下： 1．首次分别采用超临界CO2萃取法、水蒸气蒸馏法以及乙醚提取法对双肾草的挥发油成分进行提取分离，并通过GC-MS进行分析。 从超临界CO2萃取法所得挥发油中，共检测出46个化合物，鉴定了其中的32种成分，其中主要成分是：棕榈酸（52.16％）、樟脑（8.30％）、十六烷酸乙酯（7.27％）、桉油精（2.97％）、二异丁基邻苯二甲酸酯（2.51％），冰片（1.32％）；水蒸气蒸馏法提取挥发油共检测出59个化合物，鉴定了其中的33种成分，其中主要成分是棕榈酸（26.66％）、亚油酸（24.23％）；乙醚提取法提取的挥发油中共检测出96个化合物，鉴定了其中的50种成分，主要是一些长链烷烃类化合物及其衍生物。 2．通过硅胶柱层析、RP-18柱层析、Sephadex LH-20柱层析、结晶与重结晶等方法，对双肾草的块茎进行提取分离，得到9个化合物，运用1H-NMR、13C-NMR、MS等现代波谱技术，鉴定了其中的6个化合物，其中有一个为新化合物：分别为棕榈酸（Palmitic acid)（2）、9，19-cyclo-9β-lanost-24-en-3-ol（3）、β-谷甾醇（β-sitosterol）（4）、单棕榈酸甘油酯（glycerol monopalmitate）（5）、十八碳酸-1-甘油酯（Monostearin）（7）和双肾草素（2,2-dimethyl-5-methoxy -7-[2-(3’’-hydroxyphenyl)ethyl]chromene）（8）。 以上化合物均为首次从该植物中分离得到，其中化合物8为一新化合物。 3．采用苯酚-浓硫酸法首次对双肾草多糖进行含量测定，测得多糖含量为58.5％。 4．首次将提取得到的双肾草多糖对正常小鼠进行毒理学试验及免疫功能药理学试验（免疫器官重量及脏器指数、血清溶血素测定），试验结果提示双肾草多糖可显著增加小鼠脾脏重量，促进抗体的产生，结合体重的变化可以认为双肾草多糖对正常小鼠体液免疫具有一定的增强作用，表明该多糖对机体的特异性免疫功能有一定的促进作用。 本研究为首次对双肾草化学成分及其多糖的药理活性进行研究，为双肾草的进一步开发利用奠定理论基础，本研究结果同时也为兰科植物的化学分类学提供一定的理论依据。