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论文说明:缩略词
声明
前言
1毕赤酵母表达系统
1.1系统发展概况
1.2毕赤酵母表达系统的特点
1.3毕赤酵母宿主菌株
1.4毕赤酵母表达载体
1.5基因整合机理
1.6外源蛋白高效表达策略
2乙型肝炎病毒核心蛋白
2.1 HBV C基因及其编码蛋白
2.2 HBcAg结构特点
2.3 HBcAg生物学功能
2.4 HBcAg融合蛋白的表达
2.5HBcAg作为免疫载体的研究进展
3戊型肝炎和戊型肝炎病毒
3.1戊型肝炎的流行
3.2 HEV的生物学特征
3.3 HEV的分类
3.4 HEV衣壳蛋白表位研究进展
4本研究的目的与意义
材料与方法
1材料
1.1主要仪器
1.2主要试剂与材料
1.3常用溶液和培养基
2方法
2.1分子克隆
2.2毕赤酵母相关实验
2.3蛋白质性质研究方法
2.4计算机辅助分析与设计
结果与分析
1重组蛋白rHBc149-12A10的表达与鉴定
1.1引物设计
1.2目的基因的扩增
1.3重组质粒的构建
1.4酵母转化与转化子筛选
1.5重组蛋白的诱导表达
1.6酵母免疫荧光
2重组菌株表达条件优化与蛋白纯化
2.1培养基对重组菌株生长与分泌表达的影响
2.2诱导甲醇浓度对重组菌株生长与分泌表达的影响
2.3初始诱导pH值对重组菌株的生长与分泌表达的影响
2.4诱导温度对重组菌株的生长与分泌表达的影响
2.5正交试验优化诱导条件
2.6重组蛋白rHBc149-12A10的纯化
3重组蛋白rHBc-12A10的性质研究
3.1 CsCl密度梯度离心分析
3.2透射电镜观察
3.3重组颗粒rHBc149-12A10的免疫原性
3.4免疫阻断实验
3.5重组颗粒rHBc149-12A10与p239呈递12A10表位的比较
讨论
1毕赤酵母的分泌表达
2毕赤酵母的培养条件
3 HBcAg作为免疫载体的优势
小结与展望
参考文献
致谢
附录
厦门大学;