AKR1C1在胃癌细胞中的作用及其与TFF3相互关系的初步探讨

摘要

胃癌是我国最常见的消化道恶性肿瘤之一，其发病率占各种恶性肿瘤首位。TFF3是三叶因子家族的一员，在胃癌、肝癌等肿瘤中具有很高的表达，在消化道恶性肿瘤的发生、发最过程中具有重要作用。实验室前期利用酵母双杂交技术研究发现，AKR1C1为TFF3在人胃癌文库中的候选结合蛋白之一。我们通过激光共聚焦技术验证了两者在细胞存在共定位现象，为后续实验进一步探讨AKR1C1与TFF3两者之间的关系奠定了空间基础。AKR1C1是醛酮还原酶超家族的一员，在乳腺癌、食管癌、结肠癌等恶性肿瘤中均有较高表达，它不仅能够催化醛或酮成为相应醇、降解外源性化学物质，还与肿瘤的耐药性具有密切关系；但是目前国内外尚未发现关于AKR1C1与TFF3相互关系的研究。因此在本论文的研究中，我们应用RT-PCR及Western Blot方法验证了AKR1C1在正常胃黏膜细胞与不同分化程度的胃癌细胞系中的表达变化，接着用特异性增强剂EA增加胃癌细胞中AKR1C1的表达量，并利用MTT、集落形成实验、Transwell小室实验、流式细胞术等实验方法分析了上调AKR1C1的表达对胃癌细胞的增殖凋亡、迁移、侵袭等生物学行为的影响。此外，我们还构建了稳定干扰TFF3的胃癌细胞株，以此验证了TFF3对胃癌细胞增殖、迁移等生物学行为的影响，并验证了稳定干扰TFF3的胃癌细胞中AKR1C1表达含量的变化。
　　 通过上述研究，我们明确了AKR1C1的表达量与胃癌细胞的分化程度有关，胃癌细胞的分化程度越低，AKR1C1的表达量越高，并且上调AKR1C1表达量，可以促进胃癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力，并能减少胃癌细胞的凋亡；同样的，我们也发现稳定干扰TFF3后，胃癌细胞的迁移、侵袭能力有所下降，由此我们明确了AKR1C1与TFF3在胃癌细胞中具有相似的作用。我们也通过一系列的实验明确了AKR1C1与TFF3之间可能存在一定的相互联系，并具有发生相互作用的空间基础。关于两者之间具体的作用机制及其相关的信号通路，我们将在后续的实验中进一步验证。