新型双抗原夹心法乙型肝炎病毒核心抗体检测试剂的研制及其临床性能研究

摘要

乙型肝炎病毒(HBV)感染是我国乃至全球最重要的公共卫生问题之一。发展新型高性能的乙肝诊断试剂并不断改进现有试剂的质量水平是提高我国乙型病毒性肝炎临床诊治水平、降低乙肝相关疾病的发病率和病死率的关键途径。乙型肝炎病毒核心蛋白抗体(Anti-HBc)是乙型肝炎病毒感染临床诊断的重要指标之一。Anti-HBc在HBV感染早期即在血清出现，常终生持续存在，其存在指示着个体“现症”或“既往”的HBV感染。在流行病学研究中，AntiHBc阳性率是判断人群HBV总体感染率的指标；Anti-HBc是隐匿性HBV感染及其相关疾病临床诊断的筛查指标，也是HBV低流行区血液安全筛查的重要指标。
　　 国内外现有的Anti-HBc检测试剂，多基于竞争抑制免疫检测方法，存在灵敏度低、稳定性不佳等缺点，迫切需要进一步改进。本研究通过基因工程手段制备出高纯度、高活性、高均一度的重组HBcAg类病毒颗粒抗原，并基于此建立了一种新型双抗原夹心法Anti-HBc ELISA检测试剂(WT sHBcAb)。各种评价显示，该试剂分析灵敏度达到0.125 IU/mL，对各类临床标本(n=1879)的总体检测灵敏度达到99.7％(95%Cl:99.1～99.9%)，显著高于(p=0.002)雅培Architect Anti-HBc间接法试剂的98.4%(95%Cl:97.5～99.0)，远高于(p＜0.001)国产主流竞争法试剂的88.9%(95%Cl:87.0～90.7)；其总体特异性为98.7%(95%Cl:97.6～99.4%),与雅培Architect Anti-HBc间接法试剂(99.3%，95%Cl:98.4～99.8%，p=0.42)和国产主流竞争法试剂(98.6%，95%Cl:97.4～99.3%，p=0.99)基本相当。本试剂的建立可为我国乙肝临床诊断提供更为准确可靠的检测手段。