乙肝病毒X蛋白提高AIB1蛋白的稳定性并与其协同促进人类肝细胞癌的侵袭

摘要

乙肝病毒(hepatitis B virus，HBV)的持续感染与人类肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma，HCC)的发展密切相关。乙肝病毒X蛋白(Hepatitis B virus X protein，HBx)在肝癌的发展过程中发挥着重要作用。最近研究发现乳腺癌扩增性抗原1（amplified in breast cancer1，AIB1）在68％的人类肝癌组织中过表达，并且通过提高肝癌细胞的增殖和侵袭能力来促进肝癌的发展。因为HBx和AIB1都在肝癌的发展过程中起重要作用，研究目标是确定HBx和AIB1是否能够协同促进肝癌的发展。在此，发现与HBx阴性肝癌组织相比，HBx阳性肝癌组织中AIB1的蛋白水平较高。在肝癌组织中，HBx的相对蛋白水平和AIB1的相对蛋白水平呈现正相关。在不影响AIB1的mRNA水平的情况下，HBx可通过延长AIB1蛋白的半衰期来提高AIB1的蛋白水平。在机理方面，HBx通过与AIB1的结合来阻止E3泛素连接酶Fbw7α(F-box and WD repeat domain containing7α，Fbw7α)和AIB1的结合，进而抑制Fbw7α对AIB1的泛素化降解。此外，HBx和AIB1能够被募集到MMP-9基因的启动子上协同促进MMP-9的启动子活性，进而增强MMP-9在HepG2细胞中的表达，最终促进肝癌细胞的侵袭能力。研究表明HBx能够提高AIB1蛋白的稳定性并与AIB1协同促进肝癌细胞的侵袭，说明HBx和AIB1之间的联系在乙肝病毒相关的肝癌的发展过程中起着重要作用。

目录

声明

摘要

第一章 前言

1．1 SRC/p160家族概述

1．1．1 SRC/p160家族成员的发现

1．1．2 SRC/p160家族成员的结构特征

1．1．3 SRC/p160家族成员的功能机制

1．1．4 AIB1的基因定位和表达

1．1．5 AIB1的翻译后修饰

1．1．6 AIB1转基因和基因敲除小鼠模型

1．1．7 AIB1与癌症

1．2 HBx概述

1．2．1 HBV的结构特征

1．2．2 HBx的胞内定位

1．2．3 HBx的功能机制

1．2．4 HBx转基因小鼠模型

1．3 肝癌概述

1．3．1 原发性肝癌

1．3．2 转移性肝癌

1．3．3 其它类型肝癌

1．4 立题背景

第二章 材料与方法

2．1 实验材料

2．1．1 菌株

2．1．2 细胞株

2．1．3 组织样品

2．1．4 质粒

2．1．5 试剂

2．1．6 仪器设备

2．2 实验方法

2．2．1 DNA相关实验方法

2．2．2 RNA相关实验方法

2．2．3 蛋白质相关实验方法

2．2．4 细胞相关实验方法

2．2．5 其他实验方法

2．2．6 溶液配方

第三章 结果与分析

3．1 实验结果

3．1．1 AIB1蛋白和HBx蛋白在人类肝癌组织中共同过表达

3．1．2 HBx通过延长AIB1蛋白的半衰期上调AIB1的蛋白水平

3．1．3 HBx抑制AIB1蛋白的泛素化

3．1．4 HBx抑制Fbw7α介导的AIB1蛋白的泛素化降解

3．1．5 HBx抑制Fbw7α和AIB1的S/T结构域之间的相互作用

3．1．6 HBx抑制Fbw7α介导的AIB1的泛素化降解不依赖于Akt/GSK3β信号通路

3．1．7 HBx与AIB1协同提升MMP-9的启动子活性

3．1．8 HBx与AIB1通过协同提高MMP-9的表达促进肝癌细胞的侵袭

3．1．9 结论

3．2 讨论

参考文献

致谢