丹参产地加工方法的初步研究

摘要

目的：
　　初步优选丹参产地加工方法，为进一步进行丹参产地加工研究提供参考依据。
　　方法：
　　1.以丹参中丹参酮ⅡA、隐丹参酮、丹酚酸B、醇溶性浸出物含量为含量评价指标，研究不同加工方法对丹参药材质量的影响，采用综合评分法初步优选丹参的加工方法。丹参具体加工方法如下：
　　(1)未抢水洗加工法：将丹参鲜药材去掉芦头及须根分别进行晒干，阴干，40℃、60℃、80℃、100℃烘干。
　　(2)抢水洗后加工法：将丹参鲜药材去掉芦头及须根，抢水后分别进行晒干，阴干，40℃、60℃、80℃、100℃烘干。
　　(3)发汗法：①晾晒发汗法：将采挖的丹参药材抖去泥土，去掉芦头及须根晾晒至减重1/3时发汗，至根条内心由白色变成紫褐色时，再将发汗药材分别进行晒干，阴干，40℃、60℃、80℃、100℃烘干。②烘后发汗法：将采挖的丹参鲜药材抖去泥土，去掉芦头及须根，分别置鼓风干燥箱中40℃、60℃、80℃、100℃温度烘至减重1/3时发汗，至根条内心由白色变成紫褐色时，再60℃烘干。
　　(4)鲜切法：①将采挖的丹参鲜药材抖去泥土，去掉芦头及须根，切制成2～4mm的片，分别进行晒干，阴干，40℃、60℃、80℃、100℃烘干。②将采挖的丹参鲜药材抢水洗后，去掉芦头及须根，切制成2～4mm片，分别进行晒干，阴干，40℃、60℃、80℃、100℃烘干。
　　2.采集我国不同产地的12批丹参药材，建立了丹参药材HPLC指纹图谱共有模式，同时对不同加工方法的丹参药材进行了HPLC指纹图谱对比研究。色谱条件为：色谱柱为WondasilC18-WR(4.6mm×250mm，5μm)，检测波长为254nm，流速为1mL·min-1，柱温30℃，进样量10μL，洗脱时间为60min。
　　3.采用尾静脉注射垂体后叶素诱导的大鼠急性心肌缺血模型，以心率、ΔST为大鼠心电图检测指标，观察建立的模型是否成功以及晒干法、阴干法、发汗法、60℃烘干法加工的丹参药材对急性心肌缺血大鼠心电图作用。测定大鼠血清中肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化歧化酶(SOD)的含量，观察优选出加工方法的丹参药材对急性心肌缺血大鼠的药效作用。
　　结果：
　　1.综合评分法分值较高的加工方法为未抢水洗40℃烘干，未抢水洗80℃烘干及未抢水洗鲜切晒干且无显著性差异。
　　2.通过对12批丹参药材HPLC指纹图谱进行比较研究，结果建立了丹参药材指纹图谱共有模式，并确定了15个主要共有峰，其共有峰的相对峰面积和相对保留时间的RSD＜3％，不同加工方法的丹参样品HPLC指纹图谱与建立的丹参药材共有模式进行比较后，相似度除发汗法中样品S25（晾晒发汗后晒干）、S30（晾晒发汗后100℃烘干）、S31(40℃烘减1/3发汗60℃烘干)、S32(60℃烘减1/3发汗60℃烘干)、S33(80℃烘减1/3发汗60℃烘干)相似度分别为0.842、0.893、0.540、0.591、0.742较低外，其余加工方法的丹参样品相似度均在0.900以上。
　　3.在六种加工方法中，60℃烘干法加工的丹参药材对缺血后心电图心率与ST波的变化改善作用较好，阴干法加工的丹参药材对缺血后血清中生化指标改善作用较好。
　　4.六种加工方法含量测定结果与含量测定结果未呈现出正相关的关系。
　　结论：
　　1.综合评分法初步优选出的较好产地加工方法为未抢水洗40℃烘干，未抢水洗80℃烘干及未抢水洗鲜切晒干。
　　2.不同加工方法对丹参药材化学成分影响不同，在不同加工方法的丹参样品中，发汗法对丹参药材整体化学成分影响较大，其余加工方法对其影响较小。
　　3.六种加工方法中未抢水洗阴干法、60℃烘干法加工的丹参药材对缺血后心肌具有较好的保护作用。
　　4.初步得出丹参药材发挥的是整体作用，以丹参中一种或多种化学成分研究丹参产地加工方法有失偏颇，应从整体上对产地加工的丹参药材进行质量评价。

目录

声明

摘要

前言

第一章丹参产地加工方法的初步优选

1实验材料

1．1实验仪器

1．2试药

2．1不同加工方法丹参样品的制备

2．2丹参酮ⅡA与隐丹参酮含量检测方法学研究

2．3丹酚酸B含量检测方法学研究

2．4不同加工方法丹参样品的含量测定

2．5不同加工方法丹参药材中浸出物含量测定

2．5综合评分法

3结论与讨论

第二章不同加工方法丹参药材HPLC指纹图谱的研究

1实验材料

1．1实验仪器

1．2试药

2．1色谱条件的选择

1．3评价软件

2．2供试品制备条件的选择

2．2方法学考察

2．3丹参药材HPLC指纹图谱的建立及技术参数

2．4不同加工方法丹参药材HPLC指纹图谱的比较

3结论与讨论

第三章不同加工方法的丹参药材药效学初步研究

1实验材料

1．1实验动物

1．2药物及试剂

1．3实验仪器

2方法与结果

2．1药液与试剂的配置

2．2动物筛选

2．3动物的分组与给药

2．4大鼠急性心肌缺血模型的制造

2．5样本的采集及处理

2．6检测的指标及方法

2．7统计学方法

2．8不同加工方法丹参药材对急性心肌缺血大鼠心电图的影响比较

2．9不同加工方法的丹参药材对急性心肌缺血大鼠血清中生化指标的影响比较

3结论与讨论

全文总结与展望

参考文献

附录

致谢