一种新的F-box蛋白影响果蝇的发育

摘要

F-box是一段大约50个氨基酸的蛋白质基序,其功能主要是作为蛋白质与蛋白质之间相互作用的结合位点。具有F-box基序的蛋白被统称为F-box蛋白。F-box蛋白家族最初被定义为SCF泛素化连接酶复合物(Skpl,Cullin和F-box蛋白)的成分之一,负责介导被降解的底物与Skpl之间的连接。F-box蛋白在细胞周期调控、转录调节、细胞凋亡、信号转导等生命活动中发挥着重要的作用。我们实验室在果蝇体内发现了一种新的F-box蛋白,将之命名为Fblp(F-box likeprotein)。Fblp在果蝇体内由CG4221基因编码,具有F-box基序,其功能尚未被了解。本文利用果蝇作为实验动物模型,应用分子生物学和细胞生物学及遗传学的手段研究Fblp在果蝇发育和细胞周期调控中的作用,并且希望能够通过分析Fblp与其下游分子之间的互作,阐明Fblp调控细胞周期的分子机制。
　　 首先我们在果蝇翅膀中过表达Fblp,结果发现翅膀变小,由此联想到它可能与细胞周期调控及个体发育相关。随后利用果蝇中的P-element(P因子)敲除技术筛选出两株Fblp的突变体。通过Real-time PCR检测证实了突变体中Fblp表达水平确实显著降低。之后,我们通过生存能力实验、抗氧化应激实验等展开对突变体表型的研究,进一步确认了我们之前对Fblp生物学功能的猜想。为了研究Fblp发挥生理功能的分子机制,我们推测与之功能相关的一种CAK(细胞周期蛋白依赖性激酶活化激酶)类似蛋白CG6800可能是其下游底物。通过构建荧光表达载体共转人胚胎肾(HEK-293T)细胞系,我们确认了二者在293T细胞中的分布趋于一致,并且都定位于高尔基体。
　　 鉴于Fblp可能是一种对细胞周期和个体发育有重要调控作用的蛋白,对其生物学功能及相关分子机制的研究,将有助于我们进一步了解发育过程的机理。