寻常型银屑病病人外周血单个核细胞中Gaq蛋白的表达及其与疾病活动相关性研究

摘要

背景:寻常型银屑病(psoriasis vulgaris)是一种慢性复发性炎症性的皮肤病，T淋巴细胞介导的细胞免疫在银屑病的发生发展中起了重要的作用。寻常型银屑病患者外周血T淋巴细胞生物学活性异常，表现为T细胞增殖活性的增强。活化的T淋巴细胞在细胞表面粘附分子的作用下穿过血管内皮细胞浸润真皮。真皮层浸润的T淋巴细胞释放INF-γ，诱导表皮细胞合成TNF-α及各种细胞因子，吸引中性粒细胞在表皮浸润，引起皮肤炎症。Gaq是G蛋白家族中Gq/11亚家族成员之一，是由Gnaq基因编码的蛋白功能单位，广泛表达于组织器官中。体内和体外实验显示Gaq缺乏增强了T细胞存活。Gaq可能通过调控T细胞、影响多种粘附分子和细胞因子分泌，参与寻常型银屑病的发病，我们的前期实验应用PCR检测10例寻常型银屑病患者及10例正常对照PBMC中Gaq蛋白的mRNA表达水平，并进行差异化分析，发现寻常型银屑病患者Gaq的mRNA水平表达较正常显著降低(P＜0.05)，据此我们推测Gaq在寻常型银屑病的发病中可能起重要的作用。研究
　　目的:确定Gaq在寻常型银屑病外周血单个核细胞(PBMC)中的表达水平，阐明Gaq与寻常型银屑病发病或疾病活动程度的可能关系。
　　方法:搜集30例寻常型银屑病病例，经知情同意后，留取外周血10ml，并根据国际通用的PASI评分法进行病情严重程度评分，同时以30例匹配的正常人为对照，Ficoll-hypaque密度梯度离心法分离寻常型银屑病病人及正常对照的PBMC。荧光定量PCR检测寻常型银屑病病人及正常人PBMC中Gaq蛋白的表达水平。检测与寻常型银屑病疾病活动及发病相关的血清炎症指标，分析Gaq表达与寻常型银屑病疾病活动以及与寻常型银屑病疾病活动相关血清学炎症指标的相关性。探讨Gaq作为寻常型银屑病可能致病因素以及作为疾病诊断和病情检测生物标记的可能性。
　　结果:结果显示与健康对照相比，Gaq蛋白的mRNA水平在寻常型银屑病病人的外周血单个核细胞中的表达明显降低，与疾病的活动度（PASI评分、C反应蛋白）有显著相关性。
　　结论:1.寻常型银屑病病人外周血单个核细胞中Gaq表达降低。2.G蛋白家族成员Gaq可能在寻常型银屑病的发病中存在重要的作用，并可作为疾病进展期的参考指标。

目录

声明

摘要

缩略词

1．前言

2．病例和方法

2．1 主要仪器与试剂

2．2 受试者

2．3 Ficoll法分离外周血单个核细胞

2．4 逆转录PCR

2．5 实时定量PCR分析

2．6 测定血清CRP

2．7 统计分析

3．结果

3．1 病例组和对照组一般情况比较

3．2 寻常型银屑病病人的临床及实验室指标结果

3．3 寻常型银屑病病人PBMCs中的Gaq表达水平

3．4 寻常型银屑病病人PBMCs中Gaq的表达与PASI，C反应蛋白之间的关系

4．讨论

5．全文总结

5．1．结论

5．2．全文创新之处

5．3．全文不足之处

参考文献

7．综述：银屑病发病机制的免疫学因素

致谢