14-3-3σ增强胰腺癌细胞株PANC-1细胞增殖和侵袭能力

摘要

目的：采用RT-qPCR和western blot检测不同分化程度胰腺癌细胞株中14-3-3σ的表达，分析14-3-3σ与不同分化程度胰腺癌细胞株的表达相关性。探讨14-3-3σ对胰腺癌细胞株PANC-1的细胞增殖和侵袭等生物学效应。
　　方法：提取胰腺癌细胞株BxPC3、CAPAN-1、PANC-1、AsPC-1、SW1990、MiaPaCa-2、CFPAC-1的总RNA和总蛋白，将总RNA和总蛋白定量后采用RT-qPCR和westernblot在mRNA水平和蛋白水平检测七株胰腺癌细胞株中14-3-3σ的表达情况。构建针对人源性14-3-3σ全长编码区cDNA的真核表达载体pEGFP-14-3-3σ，用脂质体法将其转染入胰腺癌细胞株PANC-1中。以未转染质粒组与转染空载体pEGFP-N1组胰腺癌细胞株 PANC-1作对照。利用 RT-qPCR和Western blot分别检测胰腺癌细胞株PANC-1中14-3-3σmRNA及蛋白表达水平；应用MTS法和transwell法检测细胞增殖和侵袭能力。
　　结果：利用RT-qPCR法和westernblot法成功检测了七种不同分化程度的胰腺癌细胞株中14-3-3σ的表达水平，14-3-3σmRNA的表达水平和14-3-3σ蛋白水平均在BxPC3,SW1990和AsPC-1呈高度表达，在MiaPaCa-2和PANC-1中呈现低度表达，在CFPAC-1和CAPAN-1中表达量介于上述两者之间。构建pEGFP-14-3-3σ，将其转染 PANC-1细胞48小时后14-3-3σmRNA及蛋白表达水平显著高于转染空载体pEGFP-N1组和空白对照组（p值＜0.05）。MTS法观察到实验组细胞增殖能力较对照组呈现增快现象（p值＜0.05），transwell法检测到实验组细胞侵袭能力较对照组增强（p值＜0.05）。
　　结论：14-3-3σ与不同分化程度胰腺癌细胞株的表达相关性有助于解析其在胰腺癌细胞生长、侵袭转移中的分子机制。利用 pEGFP-14-3-3σ转染胰腺癌细胞 PANC-1可明显增加该细胞中14-3-3σmRNA和蛋白表达，并促进细胞增殖和侵袭转移，为进一步进行14-3-3σ与胰腺癌生物学效应的机制的研究奠定了实验基础。

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中文摘要

前言

第一部分：14-3-3σ在胰腺癌细胞株中的表达

1.1材料与方法：

1.2 实验结果：

第二部分：14-3-3σ促进胰腺癌细胞株PANC-1细胞增殖和侵袭能力

2.1 材料与方法

2.2 结 果：

讨论

参考文献

致谢

英文摘要

英文缩略词表

声明

附 综述: 14-3-3σ与胰腺癌