枸杞多糖对甲醛致雄性小鼠生殖毒性拮抗作用的实验研究

摘要

目的：观察甲醛对雄性小鼠的生殖毒性作用,初步探讨枸杞多糖对甲醛致雄性小鼠生殖毒性的拮抗作用。
　　方法：健康雄性昆明种小鼠96只,随机分为8组,甲醛低、中、高(0.2、2.0、20mg/(kg.d))剂量组,枸杞多糖低、中、高(50、100、200mg/(kg.d))剂量拮抗组,阳性对照组(环磷酰胺(50mg/(kg.d)))和阴性对照组(生理盐水)。甲醛染毒组和阴性对照组采用腹腔注射方式,每天1次,连续14d,阳性对照组采用腹腔注射方式,隔天1次,共14d。枸杞多糖拮抗组腹腔注射高剂量甲醛,同时灌胃不同剂量枸杞多糖溶液,每天1次,连续14d。给药结束后,处死小鼠,计算小鼠附睾、睾丸脏器系数,显微镜下计数小鼠精子数量、活动率和畸形率,测定小鼠睾丸组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量、葡萄糖6磷酸脱氢酶(G-6-PD)和山梨醇脱氢酶(SDH)活力,观察睾丸组织病理学改变,化学发光法检测小鼠血清中睾酮(T)水平,免疫组化技术检测凋亡相关蛋白bax和bcl-2表达,流式细胞术检测睾丸生精细胞凋亡率。
　　结果：甲醛低、中、高剂量染毒组睾丸脏器系数与阴性对照相比,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);枸杞多糖低、中、高剂量拮抗组与甲醛高剂量组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。精子计数和活动率随甲醛染毒剂量的增加呈下降趋势,精子畸形率呈上升趋势,与阴性对照组相比,甲醛低、中、高剂量染毒组精子计数、活动率和畸形率差异均有统计学意义(P<0.01);枸杞多糖低、中、高剂量拮抗组与甲醛高剂量组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。甲醛低、中、高剂量染毒组血清中T含量逐渐降低,与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);枸杞多糖低、中、高剂量拮抗组与甲醛高剂量组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。睾丸组织SOD随甲醛染毒剂量增加,逐渐下降,甲醛低、中、高剂量染毒组与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);枸杞多糖中、高剂量拮抗组与甲醛高剂量组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。甲醛各染毒组MDA含量逐渐增高,中、高剂量染毒组与阴性对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01);枸杞多糖低、中、高剂量拮抗组与甲醛高剂量组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。睾丸组织G-6-PD、SDH活性随甲醛染毒剂量增大而降低,甲醛低、中、高剂量染毒组G-6-PD、SDH活性与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);枸杞多糖中、高剂量拮抗组与甲醛高剂量组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。甲醛各染毒组bax阳性表达率增高,bcl-2表达下降,枸杞多糖拮抗组bax表达下降,bcl-2表达增高,甲醛低、中、高剂量染毒组与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);枸杞多糖低、中、高剂量拮抗组与甲醛高剂量组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。各实验组之间,生精细胞凋亡率均无统计学意义(P>0.05)。甲醛中、高剂量组与阴性对照组比较,睾丸组织病理学有明显改变。枸杞多糖中、高剂量组与阴性对照相比,睾丸组织结构基本一致。
　　结论：1甲醛染毒雄性小鼠具有生殖毒性,表现为:精子数量和质量的变化;睾丸组织病理学变化;睾丸标志酶活性下降;凋亡相关蛋白bcl-2、bax表达异常;2甲醛致雄性小鼠生殖毒性的机制可能为:引起睾丸组织氧化损伤;影响生殖内分泌功能;3LBP具有拮抗甲醛致雄性小鼠生殖毒性的作用,其机制可能为:抗氧化作用减轻睾丸组织氧化损伤;改善生殖内分泌功能。

目录

中文摘要

前 言

材料与方法

1 主要试剂

2 主要仪器设备

3实验动物及分组

4 实验方法

结 果

1 对小鼠日常行为的影响

2 对小鼠睾丸、附睾脏器系数的影响

3 对小鼠精子计数、精子活动率、精子畸形率的影响

4 小鼠血清睾酮（T）结果

5 睾丸组织SOD、MDA结果

6 睾丸组织葡萄糖6磷酸脱氢酶（G-6-PD）、山梨醇脱氢酶（SDH）结果

7 睾丸组织病理学观察

8 睾丸组织凋亡相关基因bcl-2、bax表达

讨 论

1 动物模型

2 对小鼠睾丸、附睾组织变化的影响

3 对小鼠精子计数、活动率和畸形率的影响

4 对小鼠血清中激素含量的影响

5 对小鼠睾丸氧化损伤的影响

6 对小鼠睾丸标志性酶的影响

7 甲醛对凋亡相关蛋白bax、bcl-2表达的影响及枸杞多糖的拮抗作用

8 流式细胞术检测睾丸生精细胞凋亡

结 论

参考文献

英文摘要

致谢

缩略词中英文对照

声明

文献综述

摘要

1 甲醛的来源

2 甲醛的毒性作用

[1]宫菁，刘敏．甲醛污染对人体健康影响及控制．环境与健康杂志，2001，18(6)：41.