疣状毛癣菌引起的脓癣并体癣1例报道及该菌的生物学特性和致病性研究

摘要

目的：1.报道1例疣状毛癣菌引起的“脓癣并体癣”的病例；2.从患儿多个部位分离菌种并通过形态学及分子生物学进行鉴定，多种培养基不同温度的形态学观察探讨该菌的表型特征，构建动物模型探讨该菌致病性。
　　方法：1.收集患儿的病史和实验室检查资料，采集患儿手臂、面部皮屑和头皮脓血、头发直接镜检并接种于SDA培养上基上28℃培养；2.分离纯化临床株，分别接种于多种培养基（PDA、SDA、YPA、YMA、CMA、CDA、MEA），并于不同温度（28℃和37℃）培养；3.通过该菌在皮肤癣菌鉴别培养基(DTM)、脑心浸汁(BHI)、溴甲酚紫固体葡萄糖琼脂(BCP-MSG)、尿素培养基上形态进行菌种鉴定；4.使用玻片培养法观察其菌落形态和镜下结构；5.采用CTAB法提取菌株DNA，PCR扩增ITS区片段，PCR产物测序并BLAST比对；6.毛发穿孔试验，观察该菌对毛发结构有无损害破坏。7.可疑菌种来源调查：前往患儿居住地收集患儿家牛棚土壤和牛毛（包括患儿家附近其它牛的毛发）；8.构建动物感染模型，研究其毒力及致病性；
　　结果：1.报道1例疣状毛癣菌引起的“脓癣并体癣”的病例。患儿男，3岁，头部皮疹伴瘙痒1+月，泛发全身10+天，根据患儿病史及临床表现，“脓癣并体癣”诊断明确，患儿发内、发外均未见孢子及菌丝，但手臂、面部皮屑和头皮脓血、直接镜检均见关节菌丝且分离出的菌落形态相同，未见其他菌生长。该菌呈先为酵母样，后逐渐长毛的白色菌落。根据其菌落形态、生长特点及镜下形态确定为疣状毛癣菌；2.在多种培养基上的表型均为绒毛状、粉末状或絮状的白色菌落，中央隆起且隆起处多为粉末状，皱褶不明显；在大部分培养基上28℃和37℃均生长良好且生长速度及表型差异不明显；3.BHI、DTM、BCP-MSG培养鉴定结果符合疣状毛癣菌；4.玻片小培养：有关节菌丝，垂直生长，菌丝粗大不规则，链状排列的厚壁孢子；5.PCR产物测序结果通过GenBank查询，BLAST分析三株菌均99％符合疣状毛癣菌；6.毛发穿孔试验阴性；7.2次采集标本均未分离出疣状毛癣菌；8.动物实验：健康昆明小鼠、免疫抑制昆明小鼠、健康豚鼠皮肤接种该菌均为未引起感染。
　　结论：1.通过各项实验证实，从该患儿体表分离菌株确系疣状毛癣菌；
　　2.该菌株在大部分培养基上、不同温度下均生长良好且生长状态差异不明显；
　　3.该菌株不能引起毛发结构破坏；
　　4.该菌株不能引起小鼠及豚鼠感染。

目录

中文摘要

前言

材料与方法

1 试验仪器与材料

2 实验方法

3 结果

3.1 病例报道

3.2 形态学观察结果

3.3 鉴别培养基结果

3.4 小培养观察结果

3.5 DNA的提取、扩增及测序结果:

3.5 毛发穿孔试验结果

3.6 菌种的采集

3.7 动物实验Ⅰ结果

3.8 动物实验Ⅱ结果

4 讨论

参考文献

英文摘要