PRL-3在人胃癌中的表达及其特异性SiRNA在体外干预的影响

摘要

目的：探讨酪氨酸磷酸酶PRL-3在胃癌组织中的表达情况及其特异性siRNA对胃癌细胞SGC901中PRL-3mRNA表达的干扰作用。 方法：1、收集福建医科大学附属协和医院肿瘤科2004年59例手术切除胃癌组织及14例癌旁组织，采用免疫组化方法检测PRL-3蛋白表达情况，并分析PRL-3表达与胃癌临床病理学特征之间的关系；2、体外转录方法合成PRL-3特异性 siRNA、scrambled siRNA；3、通过阳离子脂质体将siRNA转染入胃癌细胞SGC7901中用四甲基偶氮唑盐(MTT)检测PRL-3特异性siRNA在细胞生长中的作用，并筛选出最适合的转染浓度；采用RT-PCR分别检测转染48小时后 SGC7901中PRL-3mRNA的表达情况；细胞划痕实验检测细胞迁移能力。 结果：1、PRL-3在胃癌组织中表达水平明显高于癌旁胃粘膜组织(P=0.020)，其表达水平与浸润深度(P=0.020)、淋巴结转移(P=0.002)及TNM分期(P=0.002)有关，而与性别(P=0.149)、年龄(P=0.169)及分化程度(P=0.400)无关。2、不同浓度的siRNA都能对胃癌细胞SGC7901生长、增殖产生抑制作用，特别是浓度为．5nM的时候产生抑制作用最强；3、转染PRL-3特异性siRNA组与转染scrambled siRNA和空白对照组相比，半定量RT-PCR结果显示目的基因PRL-3条带的亮度低于scrambled siRNA对照组和空白对照组，而后两者的亮度几乎无明显差别；而且三组的内参β-actin条带却是无明显变化。4、通过细胞划痕实验比较转染．PRL-3特异性siRNA组与转染scrambled siRNA组和空白对照组，前者划痕创面伤口宽度距离明显宽于后两组。 结论：1、PRL-3与胃癌临床病理学关系密切，在胃癌发生和迁移过程中起着重要作用。2、PRL-3特异性siRNA能够抑制胃癌细胞SGC7901中PRL-3的表达，抑制胃癌细胞的生长增殖和活动。

目录

声明

摘要

前言

第一章：酪氨酸磷酸酶PRL-3在胃癌组织中的表达

一、材料和方法

二、结果

三、讨论

参考文献

第二章：PRL-3特异行SiRNA体外合成及其对胃癌细胞SGC7901的体外干预

一、材料与方法

结果

讨论

结论

参考文献

PRL-3与肿瘤的研究进展

致谢