放射性肺损伤体内外模型的建立及姜黄素衍生物FM0818防治早期放射性肺损伤的实验研究

摘要

背景与目的：放射性肺损伤是(radiation-induced lung injury)是多种胸部肿瘤放射治疗后常见的严重并发症，临床一般表现为放射性肺炎和放射性肺纤维化两个阶段。其发病机制复杂，目前没有特别有效的防治办法。研究放射性肺损伤和筛选有效的防治药物，必须建立稳定的实验模型。本课题将建立放射性肺损伤体内外实验模型，并探讨姜黄素衍生物物FM0818对早期放射性肺损伤实验模型的防治作用。 方法： (1)体外培养小鼠单核巨噬细胞RAW264.7，采用8Gy X射线单次照射建立放射性肺损伤细胞模型。并通过ELISA检测细胞释放TNF-α(tumor necrosisfactor-α)，Western Blot检测NF-κB、p53的表达对此模型进行评价和初步的机制探索。 (2)建立18Gy X射线全肺单次照射致小鼠放射性肺损伤的动物模型，于照射后2周，6周，12周，进行小鼠肺部CT扫描及图像分析，获得小鼠全肺的平均灰度值；制作肺组织病理切片，采用HE染色和胶原染色，在光镜下观察肺组织的变化。 (3)观察姜黄素衍生物FM0818防治体内外放射性肺损伤的效果。 结果： (1)8GyX射线照射后RAW264.7细胞释放TNF-α增加、NF-κB、p53表达增高，均有明显时效关系。 (2)照射后2周，6周，12周CT平均灰度值分析表明，与对照组相比，模型组平均灰度值均上升，照射后2周和6周具有显著性差异(P<0.01)；病理分析表明，与对照组相比，模型组小鼠的肺组织在照射后存在明显的病理组织学上的改变，早期以急性炎症为主，表现为肺充血、水肿、肺间质增厚，后期损伤以肺泡间隔的进行性纤维化为特征。 (3)FM0818(0.125、0.25、0.5μg/mL)能显著抑制辐射诱导的RAW264.7细胞的TNF-α释放，NF-κB、p-p38、p53的表达增高，并具有明显的量效关系；FM0818(200mg/kg)能改善小鼠早期放射性肺损伤肺部的急性炎症。 结论： (1)8Gy X射线照射小鼠单核巨噬细胞RAW264.7能够建立放射性肺损伤体外模型。TNF-α检测可以作为有效的评价指标。 (2)小鼠全肺单次照射18 Gy X射线可建立放射性肺损伤小鼠动物模型，用CT扫描，灰度分析方法可以有效地定量评价放射性肺损伤程度。 (3)姜黄素衍生物FM0818对早期放射性肺损伤的体内外模型均有一定的防治作用，并呈现出一定的剂量依赖性。其作用机制可能与下调NF-κB、p-p38、p53的表达相关。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略词表

声明

前言

第一部分放射性肺损伤体外模型的建立和鉴定

材料与方法

1.实验材料

2.实验方法

3.结果统计学处理

结果

1.X射线照射对RAW264.7细胞释放TNF-α的影响

2.X射线照射对RAW264.7细胞NF-κB(p65)核移位的影响

3.X射线照射对RAW264.7细胞p53表达的影响

讨论

第二部分放射性肺损伤小鼠动物模型的建立和鉴定

材料与方法

1.实验材料

2.实验方法

结果

1.照射后动物一般情况

2.CT灰度图平均灰度值分析

3.病理组织学改变

讨论

第三部分姜黄素衍生物FM0818防治放射性肺损伤的实验研究

材料与方法

1实验材料

2.实验方法

3.结果统计学处理

结果

1.FM0818体外防治放射性肺损伤的合适作用浓度

2.FM0818对照射后RAW264.7细胞分泌TNF-α的影响

3.FM0818对照射后RAW264.7细胞NF-κB(p65)核移位的影响

4.FM0818对照射后RAW264.7细胞p53、p-p38表达的影响

5.FM0818对早期放射性肺损伤小鼠肺脏病理学的改变

讨论

结论

参考文献

综述 放射性肺损伤的研究现状

致谢