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肾茶提取物及熊果酸对大鼠肾小球系膜细胞增殖及TGF-β表达的影响

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引言

第一部分:大鼠肾小球系膜细胞的培养及鉴定

第二部分 肾茶提取物及熊果酸对大鼠肾小球系膜细胞增殖及TGF-β1表达的影响

结论

参考文献

致谢

综述 细胞因子与系膜细胞进展

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摘要

目的:探讨肾茶提取物及熊果酸对体外原代培养的大鼠肾小球系膜细胞的增殖及转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响,为肾茶的进一步开发应用奠定基础。 方法:选用150-200g(1-2月龄)雄性SD大鼠,分离肾小球,纯化肾小球系膜细胞,并对其进行鉴定。从肾茶提取物中分离得到乙酸乙酯、正丁醇2种萃取组分,均各按相当于生药10g·kg-1.d-1、2.5g·kg-1·d-1作为高、低剂量,熊果酸按100mg·kg-1.d-1、50mg·kg-1.d-1、25mg·kg-1.d-1作为高、中、低剂量对大鼠灌胃给药后制备含药血清。以肾茶各组分及熊果酸的含药血清作为干预因素,采用CCK-8、ELISA、RT-PCR方法,观察各组含药血清对脂多糖(LPS)诱导的系膜细胞增殖、TGF-β1分泌及TGF-β1mRNA表达的影响。 结果:1.LPS能明显刺激大鼠肾小球系膜细胞增殖、TGF-β1分泌及TGF-β1mRNA表达(与空白血清组比较,P<0.01)。2.不同剂量的肾茶正丁醇组分与乙酸乙酯组分、熊果酸含药血清均明显抑制LPS刺激的大鼠肾小球系膜细胞增殖及TGF-β1分泌(与LPS对照组比较,P<0.01或P<0.05)。其中,肾茶正丁醇组分抑制作用明显优于乙酸乙酯组分,二者同剂量比较有显著性差异(P<0.01)。肾茶与熊果酸各剂量组含药血清抑制系膜细胞增殖作用未见显著性差异(P>0.05),而肾茶各组分呈剂量依赖性地抑制系膜细胞TGF-β1分泌(高、低剂量组间比较有显著性差异P<0.01),熊果酸高剂量、中剂量组抑制TGF-β1分泌明显比低剂量组强(P<0.01),但高剂量组抑制作用与中剂量组比较未见显著性差异(P>0.05)。3.肾茶正丁醇组分高、低剂量组与乙酸乙酯组分高剂量组、熊果酸各剂量组均明显抑制LPS刺激的大鼠肾小球系膜细胞TGF-β1mRNA表达(与LPS对照组比较,P<0.01或P<0.05),乙酸乙酯组分低剂量组与LPS对照组比较(P>0.05)。其中,肾茶正丁醇组分抑制作用明显优于乙酸乙酯组分,二者同剂量比较均有显著性差异(P<0.01),且高、低剂量组比较有显著性差异(P<0.01),熊果酸高剂量组抑制作用强于低剂量组(P<0.05)。 结论:1.LPS能刺激大鼠肾小球系膜细胞增殖、TGF-β1分泌及TGF-β1mRNA表达。2.肾茶提取物的正丁醇、乙酸乙酯萃取组分的含药血清均明显抑制LPS刺激的大鼠肾小球系膜细胞增殖、TGF-β1分泌及TGF-β1mRNA表达,抑制作用呈一定的剂量相关性,且正丁醇组分抑制作用明显优于乙酸乙酯组分。3.熊果酸含药血清明显抑制LPS刺激的大鼠肾小球系膜细胞增殖、TGF-β1分泌及TGF-β1mRNA表达,抑制作用呈一定的剂量相关性。肾茶及其化学成分单体熊果酸在系膜细胞增殖性疾病可能具有应用价值。

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