DPC4、P16及Bcl-2在口腔白斑和鳞癌组织中的表达及其相关性

摘要

目的：检测DPC4、P16及Bcl-2在口腔白斑和口腔鳞癌组织中的表达情况，探讨DPC4、P16及Bcl-2在口腔自斑癌变过程中变化及可能机制，且进一步了解DPC4与P16及Bcl-2的关系，为口腔癌前损害癌变的检测、口腔鳞癌的早期诊断、治疗选择及预后等方面提供参考指标。
　　 方法：取口腔白斑26例，口腔鳞癌30例和正常口腔粘膜组织10例。以4％的多聚甲醛固定，石蜡包埋，制成2μm切片，行免疫组织化学(polymer法和SABC法)检测DPC4、P16及Bcl-2蛋白的表达变化，其中每组各10例中取部分组织立即存于液氮或-80℃超低温冰箱用于提取RNA，进一步做荧光实时定量PCR检测组织中DPC4 mRNA的表达。
　　 结果：1.DPC4蛋白在10例正常口腔粘膜组织、26例口腔白斑及30例口腔鳞癌组织中表达差异有统计学意义，正常口腔粘膜组织＞白斑组织＞鳞癌组织(P＜0.01)。每组各10例中的DPC4 mRNA的表达水平亦有统计学差异，正常口腔粘膜组织＞白斑组织＞鳞癌组织(P＜0.01)。SABC法和荧光定量PCR对DPC4检测结果一致性较好(Kappa=0.932＞0.75)。2.Bcl-2蛋白在10例正常口腔粘膜组织、26例口腔白斑及30例口腔鳞癌组织中表达差异有统计学意义，正常口腔粘膜组织＜白斑组织＜鳞癌组织(P＜0.01)。3.P16蛋白在10例正常口腔粘膜组织、26例口腔白斑及30例口腔鳞癌组织中表达差异有统计学意义，正常口腔粘膜组织＞白斑组织＞鳞癌组织(P＜0.05)。4.DPC4蛋白表达与Bcl-2蛋白表达呈负相关(r=-0.827，P＜0.01)；DPC4蛋白表达与P16蛋白表达呈正相关(r=0.569，P＜0.01)。
　　 结论：1.DPC4蛋白和DPC4 mRNA的表达强度从正常口腔粘膜组、口腔白斑组到鳞癌组逐渐减弱，提示DPC4基因的缺失可能与口腔粘膜癌变有关。P16蛋白在口腔鳞癌组中的表达少于正常口腔粘膜组及白斑组，提示P16基因表达下降可能参与了口腔鳞癌的发生发展过程。Bcl-2蛋白的表达随着癌变程度增加而增加，表明Bcl-2蛋白的高表达有利于口腔粘膜癌变的发生。2.DPC4蛋白表达与Bcl-2蛋白表达呈负相关，而与P16蛋白表达呈正相关，提示了DPC4基因的缺失表达、P16基因的低表达和Bcl-2基因的过表达三者可能单独或共同参与了口腔白斑癌变过程，可作为口腔白斑癌变检测的指标。3.免疫组化法与荧光定量PCR法具有一致性，由于免疫组化对实验设备要求不高，费用相对较低，可以通过这种方法对目的基因进行初步检测。

目录

文摘

英文文摘

声明

前言

材料与方法

1、实验材料

2.实验方法

结果

1实时荧光定量PCR结果

2免疫组化结果

3荧光定量PCR检测DPC4 mRNA与免疫组化SABC法检测DPC4蛋白表达两种实验结果的相关性

讨论

结论

参考文献

致谢

综述 抑癌基因与口腔癌的研究进展