阿糖胞苷治疗大鼠急性白血病疗效指标的建立

摘要

目的：阿糖胞苷(Ara-C)是嘧啶类抗代谢药，被应用于临床急性白血病的治疗多年并取得了良好的疗效，然而仍有一部分患者不能缓解或者缓解后复发，原因较为复杂，故目前尚无能够直接反映阿糖胞苷疗效的指标。本实验的目的是建立阿糖胞苷的疗效指标，研究该指标和急性白血病大鼠存活时间的相关性，为进一步的研究以及临床上合理用药提供依据。
　　 方法：用高效液相色谱法(HPLC)测定阿糖胞苷及阿糖尿苷的浓度，色谱条件为C18柱(4.6mm×250mm i.d.，5μm)；流动相为磷酸盐缓冲液∶甲醇,95∶5(v/v)；流速为1.0mL·min-1；检测波长为280 am。SD(Sprague Dawley)大鼠尾静脉接种WEHI-3细胞1×106个/只，建立SD大鼠急性白血病模型，接种后第15天给予Ara-C1g/m2化疗。给药结束后0min，5min，15min，30min这4个时间点采取大鼠尾静脉血，HPLC测定其阿糖胞苷和阿糖尿苷的浓度，通过比较各时间点阿糖胞苷/阿糖尿苷的浓度比值(CAra-C/CAra-U)和患病大鼠的存活时间之间的相关性，分析CAra-C/CAra-U做为阿糖胞苷治疗急性白血病大鼠的疗效指标的有效性及检测方法的可行性。
　　 结果：采用HPLC法测定SD大鼠血浆中阿糖胞苷及阿糖尿苷的浓度，方法回收率、重现性、灵敏度RSD值均小于4.0％。
　　 大鼠接种后每隔5天进行一次白细胞计数，可见白细胞数明显升高，结果有统计学意义(P＜0.001)。
　　 患病大鼠静滴阿糖胞苷后，对各个时间点CAra-C/CAra-U值和患病大鼠存活时间进行相关性分析，结果表明给药结束时立即测得的CAra-C/CAra-U最能反映阿糖胞苷对急性白血病大鼠的疗效(r=0.9076，P＜0.001)，CAra-C/CAra-U和存活时间的关系呈显著正相关。
　　 结论：1.优化了高效液相色谱法测定SD大鼠血浆中阿糖胞苷及阿糖尿苷浓度的方法，具有测定简便、快速，方法回收率高、重现性好、灵敏度高、线性范围广、稳定性良好的特点。
　　 2.建立了SD大鼠急性粒单细胞白血病造模的方法，简便易行，发病率高，发病时间短，发病症状较明显，造模成功率高。
　　 3.建立了用给药结束时测得的CAra-C/CAra-U值作为阿糖胞苷对急性白血病大鼠的疗效的指标的方法。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：中英文缩写对照表

声明

前言

第一部分 HPLC法测定SD大鼠血浆中阿糖胞苷和阿糖尿苷浓度

1材料

2方法

3 结果

4小结

第二部分 SD大鼠急性白血病模型的建立

1材料

2方法

3结果

4小结

第三部分 阿糖胞苷治疗急性白血病SD大鼠的疗效性指标的相关研究

1材料

2方法

3结果

4小结

讨论

参考文献

致谢

综述 阿糖胞苷耐药机理及检测方法的研究进展