酸枣仁皂甙A对急性高眼压大鼠视网膜上缺氧诱导因子表达的影响

摘要

[目的]:
　　 1、研究急性高眼压下大鼠视网膜缺氧诱导因子的表达变化
　　 2、酸枣仁皂甙A对急性高眼压大鼠大鼠视网膜缺氧诱导因子的影响
　　 [方法]:
　　 健康成年SD大鼠240只,随机分为四组:空白对照组、模型组、模型给药组、对照给药组。建立生理盐水灌注大鼠眼前房的大鼠急性高眼压模型。在造模后,每天早上9点一次,对模型给药组及对照给药组按20mg/kg剂量从大鼠尾静脉注射酸枣仁皂甙A。术后,各组在造模后6h、24h、48h、72h按检测方法取材,进行以下操作:HE染色观察各组的结构变化；免疫荧光观察模型组、模型给药组、对照给药组视网膜上HIF-1α表达；RT—PCR检测HIF-1α mRNA在模型组、模型给药组、对照给药组视网膜上的相对表达量的变化；western blot检测HIF-1α蛋白在模型组、模型给药组、对照给药组视网膜上的表达。
　　 [结果]:
　　 1、HE染色观察到随着造模后,随着时间延长视网膜神经节细胞排列紊乱,神经纤维层水肿,内界膜破裂不连续。注射酸枣仁皂甙A后,视网膜的变化有所改善,而在对照给药组中,给药对视网膜的结构没有影响。
　　 2、免疫荧光观察视网膜上HIF—1α的表达:空白组和对照给药组几乎没有荧光表达；模型组随着造模后时间的延长,视网膜上各层都有荧光表达,主要表达在内核层和视网膜神经节细胞层；模型给药组视网膜上也有荧光表达,表达位置和模型组类似,荧光强弱没有区别。
　　 3、RT—PCR检测视网膜上的HIF-1α mRNA表达:空白组和对照给药组几乎为零；模型组随着造模后时间的延长HIF-1α mRNA的均值逐渐升高,并在48h达到峰值,与空白组和对照给药组比较差异有统计学意义；模型给药组的HIF-1α mRNA均值比模型组低,差异有统计学意义,与空白组和对照给药组比较,差异也有统计学意义。
　　 4、western blot检测视网膜上的HIF-1α蛋白表达:空白组和对照给药组HIF-1α蛋白表达几乎为零;模型组随着造模后时间的延长HIF-1α蛋白表达均值逐渐升高,并在48h达到峰值,与空白组和对照给药组比较差异有统计学意义;模型给药组的HIF-1α蛋白均值比模型组低,差异有统计学意义,与空白组和对照给药组比较差异也有统计学意义。
　　 [结论]:
　　 1、酸枣仁皂甙A可改善急性高眼压大鼠视网膜的结构,而对正常的视网膜没有影响。
　　 2、HIF-1α在正常大鼠视网膜上不表达,而在急性高眼压大鼠视网膜上表达。
　　 3、酸枣仁皂甙A可降低24h、48h、72h急性高眼压大鼠的视网膜上HIF-1α的表达。

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