慢性高眼压大鼠视网膜形态学及Brn-3a表达变化

摘要

目的:观察慢性高眼压大鼠不同时期的眼压、视网膜形态学及Brn-3a的表达变化。
　　 方法:（1）SD 雌性大鼠35只，随机分为正常对照组、模型组，大鼠左眼为模型眼，右眼为对照眼，采用Shareef-Sharma 模型，烙闭大鼠左眼3 支上巩膜静脉，建立慢性高眼压大鼠动物模型，分别于术前、术后30min、术后1d，3d，7d，14d，28d，测量双眼眼压。（2）分别于造模后1d、3d、5d、7d、14d、28d 随机过量麻醉处死，每组5只，正常对照组5只，行3 点钟位缝线标记,立即摘除大鼠眼球，浸泡于4％多聚甲醛的固定液中。48 h后沿角巩膜缘切除眼前节，剥离晶状体，余下部分逐节脱水、透明、石蜡包埋，做4μm 厚切片，烘干备用，做视网膜石蜡切片，常规苏木素-伊红染色镜下观察视网膜各层组织学改变，甲苯胺蓝染色计数视网膜神经节细胞（RGCs），用免疫组织化学法检测各个时间段Brn-3a的表达情况。
　　 结果:35只大鼠（35 眼）术前的基线眼压是（13.61±1.60）mmHg, 4W时的眼压几乎是正常眼压的1.59倍，且在4W内眼压维持稳定。光镜下正常大鼠的视网膜从内向外依次为神经节细胞层(GCL)、内核层(INL)、感光细胞层(ONL)。GCL的细胞呈单层排列，较为整齐，胞核清楚数目相对较少，INL和ONL呈多层排列，且细胞排列紧密，数目相对较多。造模鼠眼视细胞内外节断裂，RGCs 层明显空泡变且排列稀疏、细胞体积大小不一，核仁不清或无，核内染色质稀少且分布不均，神经纤维层水肿。RGCs 计数，正常对照组（n=5）RGCs是29.08±1.98（个/ 高倍视野），模型组与正常对照组相比,除1d组外均有统计学意义（p<0.05）。RGCs 层Brn-3a蛋白表达阳性的细胞在细胞核着色,与正常对照组相比，各模型组Brn-3a蛋白表达差异均有显著意义（p<0.01）。
　　 结论:采用Shareef-Sharma 模型成功地建立大鼠慢性高眼压动物模型，其眼压中等程度升高；模型组中RGCs的丢失与高眼压持续的时间存在高度相关性,高眼压时间越长,RGCs的丢失越多；Brn-3a+细胞仅存在于视网膜的GCL，Brn-3a的表达随着时间的推移、RGCs的凋亡而逐渐减少。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略词表

声明

引言

第一部分大鼠慢性高眼压模型的建立

第二部分慢性高眼压大鼠视网膜形态学及Brn-3a表达变化

结论

参考文献

致谢

综述转录因子Brn-3a在视网膜神经节细胞中的表达及意义