神经节苷脂对脑出血大鼠脑组织的保护作用及机制

摘要

目的：
　　探讨神经节苷脂对脑出血大鼠脑组织的保护作用及可能机制，以期发现脑出血急性期治疗的新途径。
　　方法：
　　1.利用立体定位仪向大鼠右侧基底节注入Ⅳ胶原酶/肝素/生理盐水溶液诱导脑出血模型，假手术组以等量生理盐水代替，治疗组则在脑出血模型的基础上分别给予神经节苷脂（15mg/kg/d、30mg/k g/d和60mg/k g/d）。
　　2.将SD大鼠随机分为五组，即假手术组（A组），脑出血组（B组），脑出血+神经节苷脂15mg/kg/d组（C组），脑出血+神经节苷脂30mg/kg/d组(D组)，脑出血+神经节苷脂60mg/kg/d组(E组)。
　　3.上述五组分别于术后12h、24h、48h和72h通过Lo nga评分法和运动功能评分法评估神经功能缺损。
　　4.脑出血组分别于术后6h、12h、24h、48h、72h和7d通过干湿重法测定脑含水量的高峰，通过RT-PCR和免疫组化法测定血肿周围INOS和ICAM-1的表达的高峰。
　　5.根据脑含水量、INOS和ICAM-1表达的高峰时间点进行神经节苷脂的干预，并分别测定上述五组中脑含水量、INOS和ICAM-1表达的变化情况。
　　结果：
　　1.大鼠发生脑出血后，24小时神经功能缺损达到高峰，72小时脑含水量达到高峰值，与假手术组相比，脑出血组神经功能缺损和脑含水量均增加（P值均<0.05）。与脑出血组相比，神经节苷脂干预组能减轻神经功能缺损、降低脑含水量（P值均<0.05）。
　　2.大鼠发生脑出血后，血肿周边区INOS和ICAM-1的表达水平均升高，出血后72小时二者的表达达到高峰，与脑出血组相比，神经节苷脂干预组能显著降低INOS及ICAM-1表达的水平（P值均<0.05）,且在实验选取的干预剂量中，30mg/kg/d比15mg/k g/d和60mg/k g/d效果更好(P<0.05)。
　　结论：
　　1.神经节苷脂能减少脑出血后脑含水量及减轻继发性神经功能缺损。
　　2.降低INOS和ICAM-1的表达水平可能是神经节苷脂减轻脑出血急性期脑水肿的机制之一。

目录

封面

声明

目录

英汉缩略词

中文摘要

英文摘要

前言

神经节苷脂对脑出血大鼠脑组织的保护作用及机制

一、材料

1.1实验动物1.2实验主要试剂

1.3主要实验器材PCR扩增仪

1.4实验试剂的配制

二、方法

2.1动物分组

2.2脑出血模型的建立

2.3大鼠脑出血模型的评分标准

2.4行为学检测(运动功能评分[8]总分9分)

2.5大鼠脑组织的收集

2.6脑组织中含水量的测定

2.7 HE染色

2.8 RT-PCR法检测脑组织中INOS和ICAM-1的表达

2.9 免疫组织化学法检测脑组织中INOS和ICAM-1的表达

三、结果

3.1神经功能缺损评分

3.2 脑含水量的测定

3.3 各组脑含水量的比较

3.4组织学观察结果

3.5神经节苷脂减少脑出血周边区的INOS的转录和表达

3.5大鼠脑出血后，脑组织出血周边区的INOS的转录和表达均升高

3.6 神经节苷脂能减少脑出血后出血周边区INOS的转录和表达

3.7 大鼠脑出血后，脑组织出血周边区的ICAM-1的转录和表达均升高

3.8神经节苷脂能减少脑出血后出血周边区ICAM-1的转录和表达

四、讨论

4.1采用Ⅳ型胶原酶构建大鼠脑出血模型

4.2大鼠脑出血后脑含水量的动态变化及神经节苷脂的影响

4.3大鼠脑出血后引起的行为学损害及神经节苷脂的改善作用

4.4神经节苷脂通过降低INOS及ICAM-1的表达起到减轻脑水肿的作用

4.5 神经节苷脂减轻脑水肿的可能机制

五、结论

参考文献

脑出血后的脑水肿发病机制研究进展

参考文献

致谢