辛伐他汀对人牙髓细胞的体外作用及机制研究

摘要

目的:
　　探讨辛伐他汀对人牙髓细胞的体外作用及机制。
　　方法:
　　1.采用改良组织块法,体外培养人牙髓细胞,并用不同级别浓度的辛伐他汀干预健康人牙髓细胞,选择对健康人牙髓细胞增殖最显著的辛伐他汀浓度来进一步细化研究;
　　2.特定级别浓度辛伐他汀干预健康人牙髓细胞及脂多糖诱导的人牙髓细胞,选择对健康人牙髓细胞及模拟炎症状态下的脂多糖诱导的人牙髓细胞效果最佳的浓度;
　　3.观察不同时间点辛伐他汀作用下的健康人牙髓细胞和炎性人牙髓细胞的血管内皮生长因子分子水平及蛋白水平表达的变化;
　　4.观察不同时间点辛伐他汀干预下的健康人牙髓细胞和炎性人牙髓细胞的骨形成蛋白-2mRNA表达变化,及碱性磷酸酶染色情况。
　　结果:
　　1.10-2μmol/mL辛伐他汀促进健康人牙髓细胞增殖,高浓度1μmol/mL则抑制健康人牙髓细胞增殖;
　　2.进一步细分同一级别的辛伐他汀浓度范围(0.5×10-2、10-2、1.5×10-2、5×10-2μmol/mL)作用于健康人牙髓细胞及炎性人牙髓细胞,10-2μmol/mL辛伐他汀促进健康人牙髓细胞增殖,而抑制炎性人牙髓细胞增殖;
　　3.干预的5、7天后,辛伐他汀能明显促进健康人牙髓细胞分泌血管内皮生长因子,脂多糖在干预的3、5天后也能明显促进健康人牙髓细胞分泌血管内皮生长因子,辛伐他汀则抑制炎性人牙髓细胞分泌和表达血管内皮生长因子;
　　4.辛伐他汀和脂多糖均促进健康人牙髓细胞骨形成蛋白-2mRNA的表达,辛伐他汀也促进炎性人牙髓细胞表达骨形成蛋白-2mRNA;
　　5.碱性磷酸酶染色深浅依次为:辛伐他汀干预的健康人牙髓细胞组、健康人牙髓细胞组、炎性人牙髓细胞组、辛伐他汀干预的炎性人牙髓细胞组。
　　结论:
　　1.10-2μmol/mL辛伐他汀促进健康人牙髓细胞增殖,而抑制炎性人牙髓细胞增殖;
　　2.适宜浓度的辛伐他汀能促进健康人牙髓细胞分泌及表达血管内皮生长因子,但抑制炎性人牙髓细胞分泌及表达血管内皮生长因子;
　　3.适宜浓度的辛伐他汀促进健康人牙髓细胞表达骨形成蛋白-2mRNA,并提高碱性磷酸酶活性;
　　4.适宜浓度的辛伐他汀促进炎性人牙髓细胞表达骨形成蛋白-2mRNA,但抑制碱性磷酸酶活性。

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前言

第一部分 辛伐他汀对健康和炎性hDPCs增殖的影响

1 材料与方法

1.1 主要试剂配制

1.2 主要器材及试剂

1.3 hDPCs培养。

1.4 hDPCs组织来源鉴定

1.5 辛伐他汀对hDPCs增殖的影响

1.6 统计学方法

2 结果

2.1 hDPCs原代培养

2.2 hDPCs鉴定

2.3 hDPCs接种密度生长曲线

2.4 不同级别浓度的辛伐他汀对健康hDPCs增殖的影响

2.5 特定级别辛伐他汀对健康hDPCs及LPS诱导的hDPCs增殖影响

3 讨论

第二部分 辛伐他汀对健康和炎性hDPCs产生VEGF的影响

1 材料与方法

1.1 主要仪器与设备

1.2 方法

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 VEGF mRNA水平

2.1 VEGF分泌量

3 讨论

第三部分 辛伐他汀对健康和炎性hDPCs成骨分化的影响

1 材料与方法

1.1 主要仪器与设备

1.2 方法

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 BMP-2 mRNA水平

2.2 ALP染色

3 讨论

全文总结

参考文献

综述

致谢