胸段硬膜外阻滞对大鼠肠缺血再灌注后Cajal间质细胞的影响

摘要

目的:
　　1.探索构建稳定性好、安全性高的硬膜外阻滞大鼠模型的方法。
　　2.研究硬膜外阻滞对肠I/R损伤后Cajal间质细胞的作用及机制。
　　方法:
　　1.成年雄性Wistar大鼠24只随机分为实验组和对照组(n=12),用于构建硬膜外阻滞大鼠模型。实验组大鼠切开置管后使用创新性关卡固定导管和不透气无菌医用胶带封闭导管;对照组则采用单纯缝线环绕法固定,保留导管接头固定于后颈部。观察28天比较两组术后发生感染率,硬膜外阻滞模型有效时间及硬膜外导管深度变化等。
　　2.成年雄性Wistar大鼠32只随机分为四组(n=8):假手术组(S组)、肠缺血再灌注组(I/R组)、胸段硬膜外生理盐水治疗组(NS组)、胸段硬膜外罗哌卡因治疗组(TEA组)。采用动脉夹夹闭肠系膜上动脉45min,再灌注12h的方法构建肠I/R损伤模型;于再灌注前5min开始,NS组硬膜外注射生理盐水100ul/kg、TEA组注射0.075％罗哌卡因,每3h一次,累计给药4次。再灌注12h后取小肠标本采用HE染色进行Chiu’S评分,免疫组化法及qRT-PCR法分别检测c-Kit蛋白和mRNA的表达量。
　　结果:
　　1.术后感染发生率:两组间差异无统计学意义(P>0.05);模型有效时间:实验组长于对照组(P<0.05);硬膜外腔内导管深度:实验组与对照组比,其均值和离散程度的差异均具有显著性(P<0.05)。
　　2.与S组比较,其他各组再灌注12h后小肠Chiu’s评分升高(P<0.05)、c-Kit蛋白和mRNA的表达量下降(P<0.05);与I/R组比较,TEA组的Chiu’S评分降低(P<0.05)、c-Kit蛋白和mRNA表达量增加(P<0.05)。
　　结论:
　　1.改良导管固定法有助于提高大鼠硬膜外阻滞模型的稳定性和成功率。
　　2.肠I/R损伤致小肠粘膜损伤、ICC结构和功能的改变。
　　3.硬膜外阻滞能减少I/R后ICC的损伤,进而促进胃肠动力的恢复。

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前言

第一部分 改良导管固定法在硬膜外阻滞大鼠模型构建中的应用

引言

材料和方法

1.1实验材料

1.2实验方法

1.3观察指标

1.4统计学分析

2 结果

2.1一般情况

2.2术后感染率

2.3模型有效时间

2.4硬膜外腔导管深度

3 结论及讨论

第二部分 胸段硬膜外阻滞对大鼠肠缺血再灌注损伤后Cajal间质细胞的影响

引言

1 材料与方法

1.1实验材料

1.2实验动物分组

1.3构建硬膜外阻滞模型

1.4构建肠I/R损伤模型

1.5采集和处理标本

1.6检测指标及方法

1.7统计学分析

2 结果

2.1一般情况

2.2组织病理结果

2.3 Chiu’S评分结果

2.4免疫组化结果

2.5 qRT-PCR结果

3 结论及讨论

3.1肠I/R损伤引起肠粘膜、ICC结构和功能的改变

3.2硬膜外阻滞能减轻肠I/R损伤

结论

参考文献

综述

致谢