尼妥珠单抗对鼻咽癌CNE-2细胞放射增敏作用的拉曼光谱研究

摘要

目的：应用拉曼光谱技术初步探讨尼妥珠单抗(h-R3)对鼻咽癌CNE-2细胞株的放射增敏作用。
　　方法：利用四甲基偶氮唑蓝比色试验法(MTT法)测定尼妥珠单抗对鼻咽癌CNE-2细胞的半数抑制浓度(IC50),取20％IC50以下四个浓度行药物放射增敏试验。实验分为对照组,单纯h-R3组,单纯照射组,h-R3联合照射组。单纯照射组细胞培养24h后,采用Eletkta-6MV直线加速器X线照射2Gy;单纯h-R3组细胞经不同浓度h-R3处理24h;h-R3联合照射组细胞在照射前以不同浓度h-R3处理24h。应用集落形成实验检测四组细胞处理2周后的细胞存活率(SF);采用Renishaw激光显微共聚焦拉曼光谱仪检测四组细胞处理24h后的拉曼光谱,每组测量20个细胞,将测得的光谱进行主成分分析和线性判别分析(PCA-LDA)。
　　结果：尼妥珠单抗对鼻咽癌CNE-2细胞的IC50约为832umol/L,故选取25,50,100ug/ml,150ug/ml四个浓度进行放射增敏试验。集落形成实验结果表明,h-R3联合照射组的SF2均低于相应浓度的h-R3组及单纯照射组(P<0.05),且随着药物浓度的增加,h-R3联合照射组的SF2减少(两两比较,P<0.05)。通过PCA-LDA分析显示,h-R3联合照射组与空白组的差异判别的灵敏度及特异度均高于单纯照射组及h-R3组,且h-R3联合照射组的灵敏度及特异度随药物浓度的增加而增加。进一步将h-R3联合照射组与单纯照射组进行拉曼光谱比较分析,从PCA散点图上看,随着药物浓度的增加,h-R3联合照射组与单纯照射组的分离趋势越发明显;从LDA后验概率图上显示,25ug/ml、50ug/ml、100ug/ml、150ug/ml时判别的灵敏度分别为65.0%、75.7%、85.0%、90.0%,特异度分别为50.0%、70.0%和81.0%、95.2%;从谱峰上看,随着药物浓度的升高,h-R3联合照射组较单纯照射组主要引起758cm-1、831cm-1、1094cm-1、1313cm-1、1338cm-1处的谱峰强度减弱,而引起1031cm-1、1557cm-1、1658cm-1处的谱峰强度增强。
　　结论：拉曼光谱分析表明,尼妥珠单抗对鼻咽癌CNE-2细胞具有放射增敏作用,其作用随着药物浓度增加而增强,150ug/ml时的作用效果最为显著,这与集落形成实验分析结果相符。拉曼光谱技术可用于药物放射增敏作用的研究。

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引 言

材料和方法

1 材料

2 方法

实验结果

1 MTT药敏实验结果

2 集落形成实验结果

3 拉曼光谱实验结果

讨论

1 拉曼光谱技术用于药物放射增敏的可行性分析

2 拉曼光谱技术用于药物放射增敏的疗效分析

3 拉曼光谱技术用于研究药物浓度对细胞放射敏感性的影响

4 拉曼光谱技术应用于药物放射增敏实验的不足和展望

结 论

参考文献

综述

致谢

硕士研究生学习期间发表的论文