白细胞介素-1β对人脐静脉内皮细胞结构及水通道蛋白-1的影响

摘要

目的：观察白细胞介素-1β(Inter le uk in-1β, I L-1β)体外作用下脐静脉内皮细胞的水通道蛋白-1(aquaporins,AQP-1)mRNA转录及蛋白表达的差异、细胞凋亡情况和细胞超微结构的改变，探讨IL-1β在重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis，SAP)毛细血管渗漏综合征(Capillary Leak Syndrome，CLS)发生机制中的可能作用。
　　方法：体外培养脐静脉内皮细胞，随机分为3组：时间组(T)，以含20ng/mlIL-1β的培养液分别培养3h(T1)、8h(T2)、12h(T3)和24h(T4)；浓度组(C)，分别以含0.2ng/ml(C1)、2ng/ml(C2)和20ng/ml(C3)IL-1β的培养液培养24h；对照组，以不含IL-1β的培养液培养24h。实时荧光定量PCR和Western blot检测AQP-1 mRNA及蛋白表达差异，流式细胞仪检测细胞凋亡情况，电镜观察细胞超微结构的改变。
　　结果：与对照组相比，时间组T1~T4和浓度组C1~C3的AQP-1mRNA转录水平和蛋白表达均下降(P<0.05)。I L-1β刺激后，细胞凋亡率增高，电镜下可见线粒体肿胀、空泡变性、细胞核溶解及细胞坏死，且随着刺激时间的延长或浓度的增高，这些改变更加明显。
　　结论：IL-1β可导致AQP-1mRNA转录水平和蛋白表达降低、细胞凋亡率增高，并破坏细胞的超微结构，这是血管内皮屏障损伤的重要原因，可能与SAP毛细血管渗漏综合征的发生密切相关。

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引言

参考文献

材料与方法

1 实验材料

1.1 实验细胞

1.2 实验试剂

1.3 实验器械

1.4 实验仪器

1.5 试剂配制

2 实验方法

2.1 人脐静脉细胞融合细胞的复苏、培养及传代

2.2 人脐静脉细胞融合细胞的分组

2.3实时荧光定量PCR检测AQP-1 mRNA的表达

2.4 Western blot检测AQP-1蛋白的表达

2.5 流式细胞仪检测细胞坏死及凋亡率

2.6 电子显微镜观察细胞形态结构的改变

结果

1、AQP-1 mRNA的表达结果

2、 AQ P-1 蛋白的表达结果

3、 流式细胞分析结果

4、 电镜分析结果

讨论

参考文献

结论

致谢

综述：

参考文献