RXRα激动剂对糖尿病小鼠肝FGF21表达的调控及其对动脉硬化的影响

摘要

目的：探讨视黄醇类X受体α(Retinoid X receptor alpha，RXRα)激动剂蓓萨罗丁(Bexarotene,Bex)对链脲佐菌素(Streptozotocin，STZ)诱导的载脂蛋白E(Apolipoprotein E，ApoE)敲除小鼠肝糖脂代谢调节蛋白成纤维细胞生长因子21(Fibroblast growth factor21，FGF21)表达的调控及其对动脉粥样硬化的影响。
　　方法：动物分组：C57小鼠（正常对照组）8只；52只ApoE-/-小鼠随机分为四组：ApoE-/-组、STZ-ApoE-/-组、STZ-ApoE-/-+Bex(10 mg/kg/d)组、STZ-Apo E-/-+Bex(30mg/kg/d)组。S TZ腹腔注射法构建糖尿病动物模型；葡萄糖氧化酶法测定血糖水平，酶法及匀相测定法测定血脂水平（以上检测均由本院检验科完成）；Real-time PCR法测肝脏组织FGF21的mRNA水平；Western blotting法肝脏组织FGF21蛋白水平；苏丹Ⅲ染色观察胸主动脉脂质斑块；H-E染色检测胸主动脉斑块面积；体外培养肝细胞用葡萄糖(25mM)及RXRα激动剂9-cis-RA(10-7M)进行干预试验并观察FGF21mRNA及蛋白表达。
　　结果：（1）与C57组相比，ApoE-/-组血糖水平无明显差别，而STZ-ApoE-/-组的血糖较C57组明显增高；蓓萨罗丁呈剂量依赖性降低STZ-ApoE-/-小鼠空腹血糖水平，STZ-ApoE-/-+Bex(30mg/kg/d)组血糖水平显著低于STZ-ApoE-/-组(14.7±2.68mM VS17.82±2.26 mM，P<0.05)；（2）与ApoE-/-组相比，STZ-ApoE-/-组小鼠肝脏FGF21表达显著增加，蓓萨罗丁呈剂量依赖性降低STZ-Apo E-/-小鼠肝脏组织FGF21mRNA及蛋白水平，STZ-ApoE-/-+Bex(10mg/kg/d)组两者表达水平明显低于STZ-ApoE-/-组（其相对值分别为:FGF21 mRN A17.54±3.15 VS40.15±6.26，P<0.05；FGF21蛋白0.192±0.030 VS0.426±0.095，P<0.05）；（3）与C57组相比，ApoE-/-组血清TG、TCHO及LDL-C水平均升高，STZ-ApoE-/-组的血脂水平更高。蓓萨罗丁可改善血清TG、TCHO、LDL-C水平，提高HDL-C水平，并抑制小鼠胸主动脉脂肪沉积、减小斑块面积，与STZ-ApoE-/-组相比，STZ-ApoE-/-+Bex(10mg/kg/d)及STZ-ApoE-/-+Bex(30mg/kg/d)动脉斑块面积均显著降低(78.72±4.62um2或46.13±7.56um2 VS94.06±8.04um2, P<0.05)。（4）高糖(25mM)干预呈时间依赖性促进小鼠肝细胞FGF21蛋白表达水平，与空白对照组相比，干预2小时后FGF21 mRNA及蛋白表达水平均显著增加(P<0.05)，干预8小时后FGF21水平达到峰点；RXR激动剂9-cis-RA(10-7M)可显著降低高糖诱导的FGF21水平。
　　结论：1、RXRα激动剂蓓萨罗丁改善糖尿病 ApoE-/-小鼠糖脂代谢及下调肝组织FGF21表达；2、RXRα激动剂蓓萨罗丁能改善糖尿病ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化；3、高糖诱导ApoE-/-小鼠肝组织FGF21mRNA及蛋白表达水平升高；4、RXRα激动剂下调FGF21表达可能与其改善血糖代谢有关。

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主要英文缩略词表

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英文摘要

前言

材料与方法

（一） 材料和仪器

1 实验动物

2 主要仪器及实验试剂

(二)、方法

1 动物饲养及干预

2 小鼠胸主动脉染色、鉴定

3 体外肝细胞培养

4 反转录-聚合酶链式反应法（ RT-PCR法）扩增小鼠肝组织、培养肝细胞FGF21 mRNA表达

5 We s te rn-blotting检测小鼠肝组织、培养肝细胞FGF21蛋白表达

6. 统计学处理

结果

1. RXRα激动剂蓓萨罗丁对STZ诱导的糖尿病ApoE-/-小鼠空腹血糖水平影响

2. RXRα激动剂蓓萨罗丁对STZ诱导的糖尿病ApoE-/-小鼠血脂水平影响

3. RXRα激动剂蓓萨罗丁对STZ诱导的糖尿病ApoE-/-小鼠胸主动脉斑块的影响

4．RXRα激动剂蓓萨罗丁对STZ诱导ApoE-/-小鼠肝组织FGF21mRNA表达影响

5．RXRα激动剂蓓萨罗丁对STZ诱导ApoE-/-小鼠肝组织FGF21蛋白表达影响

6．高糖（25mM）对肝细胞FGF21mRNA及蛋白表达影响

7． RXRα 激动剂 9-cis-RA（ 10-7M ）对高糖（ 25mM ）条件下小鼠肝细胞FGF21mRNA表达的影响

8. RXRα激动剂9-cis-RA（10-7M）对高糖（25mM）条件下小鼠肝细胞FGF21蛋白表达的影响

讨论

结论

参考文献

致谢

综述