孟鲁司特对食物过敏模型幼鼠肠道炎症的抑制作用及血OVA-IgE含量变化

摘要

目的：建立SD幼鼠卵白蛋白(Ovalbumin，OVA)食物过敏(Food Allergy，FA)模型，研究孟鲁司特(Montelukast，MK)对FA幼鼠肠道炎症的抑制作用以及血OVA-IgE含量变化，探讨MK拮抗FA肠道炎症的可能机制。
　　方法：32只3周龄雌性SD幼鼠，随机分为四组，每组各8只，分别为对照组(Non-Model Non-Intervene，M0I0组)、对照干预组(Non-Model Intervene，M0I1组)、模型组(Model Non-Intervene，M1I0组)、模型干预组(Model Intervene，M1I1组)。M1I0组和M1I1组幼鼠以OVA为过敏原，AL(OH)3为佐剂，通过腹腔注射致敏联合灌胃激发建立模型，即在第0天给予每只幼鼠腹腔注射低剂量OVA和AL(OH)3混悬液共0.2ml(含卵白蛋白40μg，AL(OH)31mg)，在第2、4、7、9、11天腹腔注射低剂量OVA40μg(0.2 mg/mlOVA溶液0.2ml)；在第20、24、28、30天给予高剂量OVA30mg(15mg/mlOVA溶液2.0ml)灌胃激发；M0I0组和 M0I1组同期分别给予同等量的生理盐水腹腔注射和灌胃。在第20开始至第30天，M0I1组和M1I1组每天予10mg/kg.d MK灌胃给药一次， M0I0组和M1I0组同期予同等容量的生理盐水灌胃。观察大鼠一般情况(体重、腹泻、活动度)，采用酶联免疫法(ELISA)检测血清OVA-IgE含量，用苏木精-伊红(HE)染色法观察肠黏膜病理改变及嗜酸性粒细胞(Eosinophils，EOS)密度，采用甲苯胺蓝染色观察肥大细胞(Mast Cell，MC)密度以及脱颗粒情况。采用SPSS19.0软件包进行统计分析，α=0.05为显著性检验标准
　　结果：M1I0组幼鼠激发后出现轻度竖毛，毛发失去光泽，活动减少或俯卧不动，大便为成形稀便；M1I1组干预后竖毛减少，活动度增加，大便较 M1I0组明显成形；M0I0组、M0I1组激发前后一般情况无明显变化。四组幼鼠在第0天(D0)、第7天(D7)、第14天(D14)、第21天(D21)、第28天(D28)、第30天(D30)同期体重相比，差异没有统计学意义(P均>0.05)。M1I0组幼鼠空肠黏膜炎症损伤明显；与 M1I0组相比，M1I1组幼鼠空肠黏膜炎症损作减轻；M0I0组和M0 I1组幼鼠肠黏膜形态结构正常。M0I0、M0I1、M1I0及M1I1组幼鼠致敏前血清OVA-IgE含量(μg/ml)分别为6.28±0.61、6.32±0.59、6.16±0.71和6.51±0.64，差异无统计学意义(P均>0.05)；激发前四组幼鼠血清OVA-IgE含量(μg/ml)分别为6.80±0.69、6.56±0.63、9.75±0.65和9.75±0.62，M1I0和M1I1组血清OVA-IgE明显高于 M0I0和M0I1组(P均<0.05)；激发后各组幼鼠血清OVA-IgE含量(μg/ml)分别为7.01±0.61、6.66±0.61、13.12±0.70和10.19±0.70，M1I0组血清OVA-IgE明显高于M0I0、M0I1组和M1I1组(P均<0.05)；M0I0、M0I1、M1I0及 M1I1组幼鼠空肠黏膜中 EOS密度(/HPF)分别为8.6±2.2、8.4±1.9、26.4±1.8和16.4±2.2；各组幼鼠空肠黏膜中MC密度(/HPF)分别为2.3±0.4、2.3±0.4、13.5±0.7及4.3±0.6；各组幼鼠空肠黏膜中MC脱颗粒率(％)分别为18.3(16.7，23.3)，19.1(17.0，22.9)，76.8(76.0，76.8)，45.1(43.0，48.6)。M1I0组EOS密度、MC密度、MC脱颗粒率均高于M0I0、M0I1组和M1I1组(P均<0.05)；析因方差分析显示：激发后外周血清OVA-IgE水平、空肠黏膜EOS密度、MC密度及MC脱颗粒率均受造模和使用MK干预两因素影响，造模与使用MK干预之间存在交互作用。
　　结论：MK可以减轻OVA致敏激发所致的FA幼鼠肠道炎症损伤，而降低外周血清OVA-IgE含量、减少肠黏膜EOS及MC浸润及降低MC脱颗粒率可能是其治疗FA的机制。

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前言

材料和方法

1实验材料

1.1实验动物及分组

1.2主要实验仪器

1.3主要实验试剂

2实验方法

2.1SD幼鼠FA模型建立及MK干预

2.2FA模型及M K疗效评价

3统计处理

结果

1各组SD幼鼠一般情况

1.1各组幼鼠外观表现及大便性状

1.2各组幼鼠体重变化

1.3各组幼鼠空肠黏膜病理改变

2各组SD幼鼠血清OVA-IgE含量

3各组SD幼鼠空肠EOS密度、MC密度、MC脱颗粒率改变

讨论

一、M K对OVA-FA模型幼鼠肠道炎症影响

二、OVA-FA模型幼鼠血IgE、肠黏膜EOS、MC变化

三、M K对 FA模型幼鼠血清OVA-IgE、肠黏膜EOS、MC影响

结论

参考文献

致谢

综述