造血干细胞移植患者白消安药动学研究及有限采样法在白消安治疗药物监测中的应用

摘要

目的
　　1.采用高效液相色谱-质谱联用法(LC-MS/MS)测定血浆白消安浓度。
　　2.评价白消安（Bu）的药动学参数药-时曲线下面积（AUC）、最大血药浓度（Cmax）、清除率（CL）等在造血干细胞移植（HSCT）患者体内的变异性。
　　3.分析临床疗效等指标与AUC的关系，初步得出HSCT患者Bu的AUC范围。
　　4.建立HSCT患者静脉滴注白消安的有限采样（LSS）模型。
　　方法
　　1.LC-MS/MS法测定白消安血药浓度，色谱条件：Agilent ZORBA SB-C18色谱柱(5μm，150mm×4.6mm)、流动相为10mmol·L-1乙酸铵缓冲液：甲醇（60:40 v/v）、流速为0.5mL·min-1、柱温35℃、进样量10μL，内标：白消安-d8。质谱条件：离子极性为正离子，离子化方式为电喷雾离子源（ESI），离子检测方式为选择性离子检测(SIM)，检测对象为白消安（[M+H]+，m/z151）和白消安-d8（[M+H]+，m/z159），雾化室压力45PSI，干燥气流速为10L·min-1，毛细管电压3.5kV，裂解电压70V，碰撞能量5V。
　　2. HSCT患者于Bu预处理第1剂前0 h和第1剂后1、2、3、4、5h和6h采集血样，用建立的LC-MS/MS法测定白消安血药浓度，利用DAS2.0软件进行统计学分析，拟合血药浓度-时间曲线，确定隔室模型，计算Bu的AUC、t1/2α、V1、Cmax、CL等药代动力学参数及其变异性。
　　3.应用SPSS20.0软件，考察年龄、性别、疾病类型等因素对Bu PK参数的影响；利用局部加权回归散点平滑法（lowess smooth）讨论临床疗效等指标与AUC的关系，Logistic回归法评价毒副作用发生率与AUC的关系，得出HSCT患者Bu的AUC范围。
　　4.应用SPSS20.0软件以稀疏血药浓度数据点建立多元回归数学模型，对模型进行Jackknife法和Bootstrap法内部验证，同时利用组内相关系数（ICC）和Bland-Altman(BA)分析方法评估经典法和LSS法的一致性。
　　结果
　　1.LC-MS/MS法测定白消安血药浓度，标准曲线方程y=1.902x+0.010，相关系数 r=0.996；线性范围：0.021-10.435μmol·L-1；白消安日内RSD≤7.1％，日间RSD≤3.8%；方法回收率为98.0%-104.8%；提取回收率分别为（105.1±2.2）%，（106.8±2.4）%，（99.0±2.0）%；血浆中内源性物质不干扰白消安的测定。
　　2.第1剂静脉给药后Bu在HSCT预处理患者体内过程符合二室模型。HSCT患者体内Bu的AUC(0-t)和AUC(0-∞)分别在356.80-946.91μmol·L-1和457.04-1379.83μmol·L-1范围内波动，t1/2α、V1、K10、K12、K21参数变异性大。
　　3.本研究发现男患者与女患者间Cmax有显著性差异；“AML/ALL”、“CML”与“MDS＂组间t1/2β有显著性差异；“Ara-c、Flu、Bu、Cy”、“Ara-c、Bu、Cy”、“Flu、Bu”、“Ara-c、Flu、Cy、Bu”间t1/2α、K12、K21有显著性差异。同时，利用lowess smooth法以移植后患者造血功能恢复时间为短期疗效指标，分析AUC与造血功能恢复时间关系，从稳定性角度考虑得出最佳AUC范围为550-850μmol·min·L-1；但Logistic回归法评价毒副作用发生率与 AUC没有显著关系，其中肝静脉闭塞综合征（Graft-versus host disease，GVHD)的发病率与年龄有关（P=0.034）。
　　4.两点（C3、C1）预测的药代动力学参数回归模型的线性关系较好（调整的r2=0.931），平均预测误差为0.25%，均方根误差为4.83%，组内相关系数的95%置信区间为0.932-0.984，BA分析一致性界限为﹣9.7-9.4。LSS法与经典法评价结果一致。
　　结论
　　1.本研究建立的LC-MS/MS法测定白消安血药浓度快速、简便、准确、适用于临床常规监测。
　　2.固定给药方案 PK参数变异性大，性别、疾病类型和预处理方案为其影响因素；结合短期临床疗效，lowess smooth法评价得出的HSCT患者的AUC范围有待进一步研究确认。
　　3.本研究建立的有限采样模型稳定可靠，优化了治疗药物监测，对HSCT患者具有较高的临床参考价值。

目录

封面

声明

目录

中英文缩略词对照表

中文摘要

英文摘要

前言

第一部分HPLC-MS/MS法测定白消安的血药浓度

1资料与方法

2 结果

3 讨论

4 小结

第二部分HSCT患者白消安药动学研究及AUC与治疗相关并发症的关系

1 材料与方法

2 结果

3 讨论

4 小结

第三部分有限采样法估算HSCT患者的白消安血药浓度

1 资料与方法

2 结果

3 讨论

4 小结

结论

参考文献

综述: HSCT患者白消安的应用及其治疗药物监测研究进展

致谢