跑台运动训练联合IL-10对脑缺血损伤大鼠神经功能恢复及轴突再生的影响

摘要

【目的】
　　观察跑台运动训练对脑缺血损伤大鼠脑组织中IL-10表达的影响，以探讨跑台运动训练促进脑缺血后神经神经结构重塑和功能重建的相关机制。
　　【方法】
　　1、体外构建载有IL-10基因过表达的慢病毒和载有针对IL-10基因siRNA的慢病毒。
　　2、健康成年清洁级雄性SD大鼠，采用随机法分为五组：假手术组（Sham组，S组，n=12）、MCAO模型组（MCAO组，M组，n=12）、运动组（MCAO+Exercise组，M+E组，n=12）、IL-10过表达组（MCAO+Lentivirus-IL-10，M+V组，n=12）、IL-10干扰联合运动组（MCAO+VsiRNA-IL-10+Exercise组，M+Vsi+E组，n=12）。
　　3、参考改良的Zea-Longa线栓法，制备大鼠大脑中动脉闭塞（Middle cerebral artery occlusion，MCAO）脑缺血模型。
　　4、IL-10过表达组、IL-10干扰联合运动组于造模成功后12h内分别经测脑室注射载有IL-10基因过表达的慢病毒、载有针对IL-10基因siRNA的慢病毒，其余组别注射等剂量Enhanced病毒稀释液对照。
　　5、运动组、IL-10干扰联合运动组于造模成功48h后进行跑台康复运动训练，每日运动30min，共2周；其余组别大鼠同样每日置于跑台仪相同时间，但不进行跑台训练。
　　6、模型组、运动组大鼠造模术后采用修正的神经行为学评分方法（mNSS）评价1d、3d、7d、10d、14d的神经功能变化情况。
　　7、ELISA法检测各组造模成功大鼠术后14d缺血区周围脑组织IL-10表达含量。
　　8、免疫组织化学染色法检测各组脑缺血区侧脑室周围小胶质细胞活化特异性蛋白IBA-1表达情况。
　　9、MCAO模型14d后灌注取脑，通过Western Blot法定量检测各组脑缺血区周围生长相关蛋白GAP-43、神经丝-200蛋白NF-200的表达量；免疫荧光法检测脑缺血中央区组织中NF-200阳性纤维生长情况。
　　【结果】
　　1、大鼠在造模后7d（P<0.05）及10d、14d（P<0.01）神经功能评分运动组明显优于模型组。
　　2、ELISA法结果显示运动组脑缺血区周围脑组织IL-10表达较模型组升高显著（P<0.05）。
　　3、免疫组织化学染色法检测各组脑缺血区侧脑室周围小胶质细胞活化特异性蛋白IBA-1表达在模型组分布密集于运动组（P<0.05）。
　　4、Western blot法、免疫荧光法结果显示，与模型组相比，GAP-43、NF200，在运动组表达升高（P<0.05、P<0.01）、IL-10过表达组两者亦增高（均为P<0.01）；IL-10干扰联合运动组对比运动组表达量降低（P<0.01、P<0.05）。
　　【结论】
　　跑台康复运动训练可抑制脑缺血后小胶质细胞的过度激活，促进结构重塑和神经功能恢复，其机制可能与调节IL-10在脑缺血周边区的表达有关。

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前言

材料和方法

1 实验仪器、试剂及其配制

2 实验动物饲养及分组

3 实验方法和步骤

4 统计分析

结果

1 大鼠大脑中动脉栓塞模型的建立

2 造模成功后TTC染色结果

3 大鼠神经功能缺损评分

4 IL-10表达测定

5 侧脑室周围区IBA-1蛋白的表达变化

6 GAP-43蛋白的表达变化

7 大鼠脑缺血中央区NF200表达

讨论

1 康复运动训练对脑缺血后神经系统重塑性影响

2 IL-10对脑缺血后神经系统可塑性的影响

结论

参考文献

综述： 康复训练对脑缺血后神经功能恢复的研究进展

致谢