多种生长因子复合物纤维蛋白凝胶释放系统对肺组织修复的促进作用

摘要

目的：
　　建立多种生长因子复合物纤维蛋白凝胶释放系统（下称“凝胶释放系统”）的动物模型，探讨“凝胶释放系统”在动物体内对肺组织增生与修复的影响。
　　方法：
　　将新西兰兔9只,随机分为3组，每组各3只，分别在全身麻醉下行介入操作。生长因子组：将含多种生长因子的纤维蛋白溶液7ml及合适浓度的凝血酶溶液0.7ml经可弯曲性支气管镜向右肺中叶保留灌注，在灌注区形成“凝胶释放系统”，使系统缓慢释放出各种生长因子。无生长因子组：纤维蛋白溶液7ml及凝血酶溶液0.7ml经可弯曲性支气管镜向右肺中叶保留灌注。对照组：对右肺中叶行支气管镜检查。术后14天，麻醉处死动物，采集标本，Sircol collagen assay试剂盒检测肺总胶原蛋白含量（包括I-V型胶原）；免疫组化法检测I型胶原蛋白表达；Western blot检测II型胶原蛋白表达，HE染色检测肺泡间隔厚度和肺间质MVD(micro-vessel density，微血管计数)，real time RT-PCR检测SPA（surfactant protein A，表面活性蛋白A）mRNA表达。
　　结果：
　　（1）肺泡间隔厚度:对照组为38.389±9.160nm，无生长因子组为41.267±11.845nm，生长因子组为59.500±13.904nm。生长因子组与无生长因子组（P=0.000）、生长因子组与对照组（P=0.000）之间均存在显著差异；而无生长因子组与对照组之间无显著差异（P=0.462）。
　　（2）肺总胶原蛋白含量：对照组为41.563±8.255，无生长因子组为45.349±19.039，生长因子组为89.261±24.837。生长因子组与无生长因子组（P=0.001，t=4.070）、生长因子组与对照组（P=0.000，t=4.421）之间存在显著差异；而无生长因子组与对照组之间无显著差异（P=0.731,t=0.351）。
　　（3）I型胶原蛋白表达：area sum（sum of staining positive area,阳性区域面积总和）：对照组为3.9703104±5.1373104，无生长因子组为7.6363104±5.1013104，生长因子组为16.0253104±6.4833104。生长因子组与无生长因子组（P=0.000）、生长因子组与对照组（P=0.000）之间存在显著差异；而无生长因子组与对照组之间无显著差异（P=0.052）。AOD sum（sum of average optical density,平均光密度总和）：对照组为101.118±99.448，无生长因子组为170.274±82.221，生长因子组为249.875±75.725。生长因子组与无生长因子组（P=0.000）、生长因子组与对照组（P=0.007）、无生长因子组与对照组（P=0.047）之间存在显著差异。IOD sum（sum of integral optical density,积分光密度总和）：对照组为2.0303104±2.6223104，无生长因子组为3.9103104±2.6213104，生长因子组为8.2563104±3.3163104。生长因子组与无生长因子组（P=0.000）、生长因子组与对照组（P=0.000）之间存在显著差异；而无生长因子组与对照组之间无显著差异（P=0.052）。
　　（4）II型胶原蛋白表达：待测样品中未见明显II型胶原蛋白表达。
　　（5）肺间质MVD：对照组为2.667±1.155，无生长因子组为3.417±1.379，生长因子组为3.750±1.055。生长因子组与对照组之间有显著差异（P=0.035，t=30.952）；而生长因子组与无生长因子组（P=0.502,t=0.664）、无生长因子组与对照组（P=0.137,t=5.474）之间无显著差异。
　　（6）SPA mRNA含量：无生长因子组为1.87±2.09，生长因子组为7.53±6.64。生长因子组和无生长因子组之间无显著差异（P=0.232，F=1.986）。
　　结论：
　　在新西兰兔肺内建立多种生长因子复合物纤维蛋白凝胶释放系统，该系统从以下几方面促进肺组织的修复：
　　（1）促进胶原蛋白合成与释放；
　　（2）促进肺间质纤维细胞及毛细血管增生；
　　（3）引起肺间质炎性渗出，中性粒细胞浸润。

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综述:生长因子对肺组织修复的影响

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