替米沙坦对人非小细胞肺癌A549细胞生长增殖和VEGF、MMP-2表达的影响

摘要

目的：
　　替米沙坦是AT1R（Angiotensin II type1 receptor，血管紧张素II的1型受体）特异性拮抗剂，近年来的研究表明，它在肿瘤细胞的生长、增殖、凋亡、侵袭以及转移等过程中发挥重要的调节作用。本研究拟在相关研究背景的基础上进一步探讨替米沙坦在体外对人非小细胞肺癌A549细胞生长增殖的影响，并对其可能的机制进行初步探讨。
　　方法：
　　RT-PCR和Western blot分析A549细胞AT1R的表达以及替米沙坦作用后的AT1R表达变化情况，MTT法检测替米沙坦对A549细胞生长增殖的影响，流式细胞术分析替米沙坦对A549细胞周期的影响，Annexin V-FITC/PI双染法检测替米沙坦对A549细胞的凋亡诱导情况。然后采用ELISA检测替米沙坦作用后A549细胞分泌的VEGF蛋白量，明胶酶谱法检测MMP-2的活性，RT-PCR分析VEGF mRNA和MMP-2 mRNA的表达水平。
　　结果：
　　人非小细胞肺癌A549细胞表达AT1R，不同浓度的替米沙坦（10-6 M、10-5 M以及10-4 M）均能一定程度地抑制A549细胞的生长增殖，且具有时间和浓度依赖性。此外，替米沙坦也能以时间和浓度依赖的方式拮抗Ang-II对A549细胞生长增殖的刺激作用。不同浓度的替米沙坦与A549细胞作用48h后，随着药物浓度的增加，A549细胞的AT1R表达水平逐步下调，细胞周期出现明显的G1期阻滞，细胞凋亡率逐渐增加、且以早期凋亡为主。此外，A549细胞分泌至培养上清液中的VEGF蛋白含量也随着替米沙坦浓度的增加逐渐下降，MMP-2酶解活性也随之降低，VEGF mRNA和MMP-2 mRNA的表达水平也在替米沙坦最高作用浓度（10-4 M）时降到最低。
　　结论：
　　替米沙坦以时间和浓度依赖的方式抑制人非小细胞肺癌A549细胞的生长增殖，其可能的作用机制包括：替米沙坦通过与A549细胞的AT1R结合从而激活胞内相关信号传导通路，引起细胞周期阻滞，并最终导致细胞凋亡。此外，通过下调A549细胞的VEGF和MMP-2表达水平，从而降低A549细胞的生长、增殖、迁移和侵袭能力。

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前言

材料和方法

1. 材料

2. 方法

结果

1. 人非小细胞肺癌A549细胞AT1R的表达情况

2. 替米沙坦对A549细胞生长增殖的影响

3. 替米沙坦对A549细胞AT1R表达的影响

4. 替米沙坦对A549细胞周期的影响

5. 替米沙坦对A549细胞凋亡的影响

6. 替米沙坦对A549细胞VEGF表达的影响

7. 替米沙坦对A549细胞MMP-2活性和表达的影响

讨论

结论

参考文献

综述: 替米沙坦：一个潜在的抗肿瘤治疗药物

致谢