急性弓形虫感染对白细胞介素-33敲除小鼠腹腔巨噬细胞功能和极化的影响

摘要

目的：
　　本文研究IL-33敲除（IL-33-/-）对小鼠急性弓形虫感染腹腔巨噬细胞（pMφ）极化的影响，探讨IL-33敲除在弓形虫感染免疫应答中的作用。
　　方法：
　　1.野生型（WT）C57BL/6小鼠和IL-33-/-小鼠急性弓形虫速殖子感染30min后，检测pMφ吞噬能力；
　　2.收集小鼠pMφ，各分为感染组和未感染组，Real-time PCR检测pMφiNOS、Arg-1、IL-1、IL-10、IL-12的mRNA；
　　3.ELISA检测pMφTNF-α、IL-10、IL-12；
　　4.Griess法检测pMφNO；
　　5.流式细胞术检测pMφ表面分子（CD80、CD86、CD206、TLR2、TLR4、MHCⅡ）；
　　6.统计学处理方法为采用SPSS19.0软件，采用多因素方差分析的裂区设计进行比较。
　　结果：
　　1.小鼠感染弓形虫后，IL-33-/-小鼠pMφ吞噬百分率（0.95±0.01）低于WT小鼠（0.98±0.01，P＜0.05）。
　　2.IL-33-/-小鼠感染弓形虫pMφIL-1、IL-10、IL-12、iNOS、Arg-1mRNA水平与其他组无差异（P＞0.05）。
　　3.IL-33-/-和WT小鼠感染组pMφNO分泌水平（31.62±14.47μM、15.77±9.16μM）分别高于其未感染对照组（28.46±12.60μM、11.94±9.62μM，P＜0.01）；IL-10分泌水平（6229.70±3673.16pg/ml、4637.62±1645.85pg/ml）分别高于其未感染对照组（5811.18±3484.13pg/ml、4395.06±1469.16pg/ml，P＜0.05）；TNF-α分泌水平（1732.49±325.17pg/ml，1488.35±757.99pg/ml）分别高于其未感染对照组（1602.31±247.94pg/ml、1324.04±623.64pg/ml，P＜0.01）；提示弓形虫感染促进了小鼠pMφNO、IL-10及TNF-α的分泌。
　　IL-33-/-小鼠感染组pMφNO分泌水平高于WT小鼠感染组（P＜0.01），提示IL-33敲除促进了小鼠pMφNO的分泌；而IL-10、TNF-α分泌水平与WT小鼠感染组比较无差异（P＞0.05）。
　　4.IL-33-/-小鼠感染组pMφCD86阳性率（90.53±6.67%）高于未感染组（61.69±8.08%，P＜0.01）；WT小鼠感染组pMφCD86阳性率（50.49±22.99%）高于未感染组（37.86±12.74%，P＜0.01）；IL-33-/-小鼠感染组与WT小鼠感染组pMφCD86阳性率无差异（P＞0.05）,提示弓形虫感染促进了pMφCD86的表达。
　　5.IL-33-/-小鼠感染组与未感染组、WT感染组和未感染组pMφCD80、CD206的阳性率表达无差异（P＞0.05）。而IL-33-/-小鼠感染组pMφCD206的阳性率低于WT感染组（P＜0.01，独立样本t检验）。
　　6.IL-33-/-小鼠感染组和未感染组pMφTLR2阳性率无差异（P＞0.05）；WT小鼠感染组和未感染组pMφTLR2阳性率无差异（P＞0.05）；IL-33-/-小鼠感染组pMφTLR2阳性率（54.44±9.88%）低于WT小鼠感染组（64.20±17.77%，P＜0.01），提示IL-33敲除抑制了TLR2表达。
　　7.IL-33-/-小鼠感染组pMφMHCⅡ分子阳性率（58.07±10.76%）高于未感染组（53.97±13.83%,P＜0.01）；WT小鼠感染组pMφMHCⅡ分子阳性率（43.20±13.73%）高于未感染组（34.99±11.20%,P＜0.01）；IL-33-/-小鼠感染组与WT小鼠感染组pMφMHCⅡ分子表达无差异（P＞0.05），提示弓形虫感染促进MHCⅡ分子表达。
　　8.IL-33-/-小鼠感染组pMφTLR4阳性率（1.84±0.43%）高于未感染组（1.26±0.57%,P＜0.01）；WT小鼠感染组pMφTLR4阳性率（1.06±0.27%）高于未感染组（0.63±0.28%,P＜0.01）；IL-33-/-小鼠感染组pMφTLR4表达高于WT小鼠感染组（P＜0.05），表明IL-33敲除促进TLR4表达。
　　结论：
　　在急性弓形虫感染早期，IL-33敲除驱动小鼠pMφ向M1方向极化，促进pMφ抗感染。

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