全反式维甲酸下调人脑胶质瘤细胞Notch1信号和诱导分化作用的初步研究

摘要

目的：研究全反式维甲酸（ATRA）对胶质瘤细胞增殖、分化的影响，并探讨胶质瘤细胞中Pin1与Notch1信号的相关性。
　　方法：
　　1.CCK-8法检测ATRA对胶质瘤细胞系U251和U87增殖的抑制作用。
　　2.细胞免疫荧光染色法检测ATRA处理后U251和U87细胞中GFAP的表达情况。
　　3.Western blotting检测ATRA处理后U251和U87细胞中Pin1、Notch1、Hes1、MDR1和MRP1表达。
　　4.细胞免疫荧光染色法检测ATRA处理后U251和U87细胞中Pin1、Notch1、Hes1的表达。
　　5.用Pin1基因表达载体转染U251、U87细胞，获得Pin1高表达的U251和U87细胞（U251-pin1和U87-pin1），经Western blotting鉴定后，检测其Notch1和Hes1的表达情况。
　　结果：
　　1.CCK-8实验结果表明ATRA对U251和U87细胞均有增殖抑制作用，并且这种抑制作用有明显的时间-剂量依赖性。
　　2.免疫荧光染色结果显示ATRA处理后，U251和U87细胞中GFAP的表达均高于对照组细胞，提示ATRA能够诱导胶质瘤细胞分化。
　　3.Western blotting结果表明ATRA处理后的U251和U87细胞中Pin1、Notch1、Hes1、MDR1和MRP1的表达均下调。
　　4.细胞免疫荧光染色结果显示ATRA处理后的U251及U87细胞中Pin1、Notch1和Hes1的表达均减弱。
　　5.Western blotting结果显示高表达Pin1的转染细胞（U251-pin1,U87-pin1）中Notch1和Hes1表达亦上调。
　　结论：
　　1.ATRA能够诱导神经胶质瘤U251和U87细胞分化，抑制细胞增殖。
　　2.ATRA抑制Pin1的表达进而下调Notch1及下游靶分子Hes1的表达，ATRA还可抑制胶质瘤细胞中多药耐药蛋白MDR1和MRP1的表达。

目录

声明

英文缩略词表

前言

材料与方法

1 材料

2 方法

结果

1 ATRA对U251和U87细胞的作用

2. ATRA 处理后各组细胞中 Pin1、Notch1、Hes1 及耐药蛋白表达变化

3. PIN1基因高表达细胞中Pin1、Notch1及Hes1的检测

讨论

1. ATRA与胶质瘤细胞的增殖和分化

2. 胶质瘤中Pin1和Notch1的相关性

3. ATRA与胶质瘤细胞耐药相关蛋白MDR1、MRP1的表达

结论

参考文献

综述:Pin1与Notch信号在肿瘤中的作用及二者的相关性

致谢