泽蛙的性腺分化及温度对性别决定的影响

摘要

本文采用组织学方法观察了泽蛙(Rana limnocharis)原始生殖细胞(PGCs)的迁移、生殖嵴生成和性腺分化；用免疫组织化学方法，检测了对照组和高温组的性腺组织中芳香化酶活性。 实验结果显示，1日龄蝌蚪PGCs已迁移到背肠系膜两侧的腹膜上皮上，单个分布；2日龄蝌蚪腹膜上皮的不同位置有数个PGCs；4日龄时蝌蚪生殖嵴形成；17日龄原始性腺形成；22日龄性腺开始分化；孵化后45天，大部分蝌蚪完成变态。蝌蚪孵化出来后便用不同水温(18±1)℃、(23-25)℃、(30±1)℃、(32±1)℃、(34±1)℃培育至变态。实验结束后统计蝌蚪雌性比例和雄性率。对照组(23-25)℃的雌雄比例接近1:1(1:1.06)；(18±1)℃实验组的雌雄比例为1.83:1，雄性率为35.1％；(30±1)℃实验组的为1:1.67，雄性率为62.1％；(32±1)℃实验组的为1:1.98，雄性率为66.4％；(34±1)℃实验组的为1:2.86，雄性率为74.0％。低温(18±1)℃使蝌蚪雌性化，高温(30±1)℃、(32±1)℃、(34±1)℃使蝌蚪雄性化。 在性腺分化前后，原始性腺中的PGCs和刚分化后的卵巢中的卵原细胞或精巢中的精原细胞就难以分辩，为了对这三种细胞有进一步的认识，在泽蛙的性分化研究中采用电镜技术对其进行制片和观察。 芳香化酶主要定位于蝌蚪的性腺中：卵巢中的卵原细胞和滤泡细胞，以及精巢的间质中。无论是对照组还是实验组，性分化前蝌蚪性腺中都没有芳香化酶的表达。随着性分化的进程，芳香化酶的表达逐渐增强。对照组(23-25)℃，芳香化酶活性较强，实验组(32±1)℃，芳香化酶活性较弱。性腺分化后，卵巢的芳香化酶活性比精巢强。

目录

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摘要

中文文摘

第1章绪论

1.1研究主题和意义

1.2原始性腺的形成

1.2.1原始生殖细胞的特点

1.2.2原生殖细胞的发生

1.2.3原生殖细胞的迁移

1.3两栖动物性别决定方式

1.3.1两栖动物的基因型性别决定

1.3.2两栖动物的环境型性别决定

1.4本文的研究设想，拟采用的研究方法和技术路线

1.5预期的研究结果和科学意义

第2章泽蛙的性腺分化及温度对性腺分化的影响

2.1前言

2.2材料与方法

2.2.1实验材料的获得

2.2.2不同水温的培育方法

2.2.3取材及组织学制片

2.2.4数据分析

2.3实验结果

2.3.1性腺发生及分化

2.3.2温度对性腺分化的影响

2.3.3温度处理对泽蛙蝌蚪生长的影响

2.4讨论

2.4.1泽蛙性腺分化的特点

2.4.2温度对泽蛙性腺分化的影响

2.4.3温度对泽蛙生长发育的影响

第3章泽蛙原生殖细胞、卵原细胞和精原细胞的超微结构观察

3.1前言

3.2材料与方法

3.3结果

3.3.1原生殖细胞

3.3.2卵原细胞

3.3.3精原细胞

3.4 讨论

第4章P450芳香化酶在泽蛙性腺中的免疫活性定位

4.1前言

4.2材料与方法

4.2.1实验材料的处理

4.2.2试验仪器与耗材

4.2.3实验步骤

4.2.4实验结果

4.3讨论

结论

参考文献

攻读学位期间承担的科研任务与主要成果

致谢

个人简历