龙眼体胚发生过程中SERK等胚性相关基因的克隆与表达分析

摘要

本研究以龙眼(Dimocarpus longan Lour.cv.Honghezi)胚性愈伤组织为材料，克隆SERK等胚性相关基因(SERK基因、14-3-3基因和 AGL15基因、LEC基因、CHI-I基因)及其启动子，并采用q-PCR分析其表达水平在龙眼体胚发生过程中的动态变化规律，以期为进一步了解SERK等胚性相关基因在龙眼体胚发生中的调控机制奠定基础。主要研究结果如下：
　　 1龙眼体胚发生过程中SERK等5个胚性相关基因及其启动子的克隆
　　 采用RT-PCR结合RACE方法和 TAIR-PCR，克隆得到龙眼胚性愈伤组织SERK等5个胚性相关基因(SERK基因、14-3-3基因和AGL15基因、LEC基因、CHI-I基因)及其启动子：①龙眼胚性愈伤组织SERK基因(DlSERK1)，1875bp的cDNA全长序列(登录号：FJ013227)，包含一个长为1875bp的ORF；DNA扩增序列长为6009bp(登录号：HM773391.1)，包含11个外显子、10个内含子，内含子的剪切位点均符合

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第一章 引言

1 植物体细胞胚胎发生的的分子机制

1.1 植物体细胞胚胎发生相关基因的分离

1.2 植物体细胞胚胎发生的相关蛋白的分离

1.3 植物体细胞胚胎发生相关基因的表达

2 植物体细胞胚胎发生相关类受体蛋白激酶(SERK)基因的研究进展

2.1 SERK基因结构特征

2.2 SERK编码的蛋白

2.3 SERK基因及其蛋白的功能

2.4 植物中SERK基因的克隆

3 植物14-3-3蛋白基因研究进展

3.114-3-3蛋白基因家族

3.214-3-3蛋白家族的调控机制

3.314-3-3蛋白家族的生物学功能

3.414-3-3蛋白基因的分子克隆和表达

4 植物MADS-box基因AGL15的研究进展

4.1 MADS-box基因的结构

4.2 MADS-box蛋白转录因子

4.3 MADS-box基因的分类

4.4 植物MADS-box基因的功能和调节机理

4.5 AGL15基因的研究进展

5 植物叶状子叶基因LEC1(LEAFY COTYLEDON 1)基因家族研究进展

5.1 LEC1基因

5.2 LEC1的生物学功能

5.3 LEC2基因

6 植物几丁质酶基因(CHI)的研究进展

6.1 植物几丁质酶的分类与结构特征

6.2 植物几丁质酶基因结构

6.3 植物几丁质酶基因及其植物几丁质酶的生物学作用

6.4 植物几丁质酶基因的克隆

7 龙眼体胚发生的分子生物学研究进展

7.1 龙眼体细胞胚胎发生

7.2 龙眼体胚发生相关基因克隆

7.3 龙眼体胚发生过程蛋白质组学研究

7.4 龙眼体胚发生相关基因的定量表达

8 本研究主要内容及意义

8.1 主要内容

8.2 本研究意义

第二章 龙眼体胚发生过程中SERK基因及其启动子的克隆与生物信息学分析

第一节 龙眼胚性愈伤组织SERK基因cDNA克隆

1 材料与方法

2 结果与分析

3 讨论

第二节 龙眼胚性愈伤组织SERK基因DNA全长的克隆及内含子分析

1 材料与方法

2 结果与分析

3 讨论

第三节 龙眼胚性愈伤组织SERK基因的生物信息学分析

1.材料与方法

2 结果与分析

3 讨论

第四节 龙眼胚性愈伤组织SERK基因启动子的克隆及生物信息学分析

1 材料与方法

2.结果与分析

3 讨论

第三章 龙眼体胚发生过程14-3-3基因及其启动子的克隆与生物信息学分析

第一节 龙眼胚性愈伤组织14-3-3基因克隆及内含子分析

1 材料与方法

2 结果与分析

3 讨论

第二节 龙眼胚性愈伤组织14-3-3基因的生物信息学分析

1.材料与方法

2 结果与分析

3 讨论

第三节 龙眼胚性愈伤组织14-3-3基因启动子的克隆及生物信息学分析

1 材料与方法

2.结果与分析

3 讨论

第四章 龙眼体胚发生过程AGL15基因及其启动子的克隆与生物信息学分析

第一节 龙眼胚性愈伤组织AGL 15基因cDNA全长克隆

1 材料与方法

2 结果与分析

3 讨论

第二节 龙眼胚性愈伤组织AGL15基因DNA全长克隆及内含子分析

1 材料与方法

2.结果与分析

3 讨论

第三节 龙眼胚性愈伤组织AGL15基因的生物信息学分析

1.材料与方法

2 结果与分析

3 讨论

第四节 龙眼胚性愈伤组织AGL 15基因启动子的克隆及生物信息学分析

1 材料与方法

2.结果与分析

3 讨论

第五章 龙眼体胚发生过程LEC1基因及其启动子的克隆与生物信息学分析

第一节 龙眼胚性愈伤组织LEC1基因cDNA克隆

1 材料与方法

2 结果与分析

3 讨论

第二节 龙眼胚性愈伤组织LEC1基因DNA全长克隆及内含子分析

1 材料与方法

2.结果与分析

3 讨论

第三节 龙眼胚性愈伤组织LEC1基因的生物信息学分析

1.材料与方法

2 结果与分析

3 讨论

第四节 龙眼胚性愈伤组织LEC1基因启动子的克隆及生物信息学分析

1 材料与方法

2.结果与分析

3 讨论

第六章 龙眼体胚发生过程CHI-Ⅰ基因及其启动子的克隆与生物信息学分析

第一节 龙眼胚性愈伤组织CHI-Ⅰ基因克隆

1 材料与方法

2 结果与分析

3 讨论

第二节 龙眼胚性愈伤组织CHI-Ⅰ DNA全长的克隆及内含子分析

1 材料与方法

2.结果与分析

3 讨论

第三节 龙眼胚性愈伤组织CHI-Ⅰ基因的生物信息学分析

1.材料与方法

2 结果与分析

3 讨论

第四节 龙眼胚性愈伤组织CHI-I基因启动子的克隆及生物信息学分析

1 材料与方法

2.结果与分析

3 讨论

第七章 龙眼体胚发生过程中SERK等胚性相关基因的实时荧光定量PCR 分析

1 材料和方法

2 结果与分析

3 讨论

第八章 小结

1 龙眼体胚发生过程中SERK等5个胚性相关基因及其启动子的克隆

2 龙眼体胚发生过程中SERK等5个胚性相关基因的生物信息学分析

3 龙眼体胚发生过程中SERK等5个胚性相关基因实时荧光定量PCR分析

3.1 龙眼体胚发生过程中SERK等胚性相关基因的定量表达情况

3.2 龙眼体胚发生过程中SERK等胚性相关基因表达情况相互之间的联系--

参考文献

附录一 龙眼体胚发生过程中SERK基因序列登录GenBank信息

附录二 龙眼体胚发生过程中14-3-3基因序列登录GenBank信息

附录三 龙眼体胚发生过程中AGL15基因序列登录GenBank信息

附录四 龙眼体胚发生过程中LEC基因序列登录GenBank信息

附录五 龙眼体胚发生过程中CHI-Ⅰ基因序列登录GenBank信息

附录六 龙眼体胚发生过程中CHI-Ⅲ基因序列登录GenBank信息

攻读博士学位期间发表论文与参加学术会议情况

致谢