新型ER共调节因子在乳腺癌发生中的作用及机制研究

摘要

乳腺癌是目前威胁女性健康最常见的恶性肿瘤之一，雌激素信号通路在乳腺癌的发生发展中扮演重要角色。ER信号通路与其他通路调控关系密切，ER既可以通过经典的核转导途径介导多种细胞广泛的生理效应，又可以通过膜转导途径实现快速信号通路转导，调控基因转录和细胞的增殖。ER信号通路作为胞内复杂信号交互网络的组成部分，其异常调控与肿瘤恶化、转移和内分泌治疗耐受密切相关。ER与共调节因子相互作用，受其影响并发挥生物学功能，因此发现并研究新的ER共调节因子对于完善ER信号通路、阐明乳腺癌的发病机理、探索乳腺癌的治疗方法、开发有效的治疗药物都具有重要意义。
　　本文研究雌激素受体相互作用蛋白-GA5，而且GA5是雌激素信号通路中的共调节因子。免疫共沉淀实验证明了GA5与ERβ、ERa的DBD结构域相互作用，并且ERβ与GA5Δcoil-coil结构域相互作用。为了进一步研究GA5的生物学功能，利用酵母双杂交的实验发现GA5能与SUMO化相关的酶类相互作用。经过我们的研究发现GA5能发生SUMO化，且能增强ERβ的SUMO化，但是不能增强ERβK4R的SUMO化。进一步的研究表明GA5Δcoil-coil不能增强ERβ的SUMO化。荧光素酶活性的测定GA5能降低ERβ的活性，半衰期实验表明GA5能稳定ERβ的蛋白水平量，Real-time PCR确定GA5调节ERβ下游基因P21和PRb。激光共聚焦实验表明GA5定位在核斑点序列上，且GA5（1-147）的片段使其定位在核斑点上；生长曲线实验说明GA5能抑制ZR751和HepG2细胞的生长；流式细胞技术表明GA5能调节细胞周期，且能把细胞阻止在G0G1期。
　　综上所述，GA5在信号通路中，作为共调节因子与ERβ相互作用，发挥重要的功能，深入的研究可能有利于临床肿瘤治疗与预后评估，为肿瘤的发病机理的研究提供有益的思路和分子靶标。

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前 言

1简介乳腺癌

2 ER受体

3共调节因子

4 SUMO化

5课题研究意义与技术路线

材料与方法

1 材料

2. 方法

结 果

1 GA5与ERs间的相互作用

2 GA5对ERβ类泛素化修饰的调节

3 GA5的生物学功能

讨 论

结 论

参考文献

致谢