枯草芽孢杆菌BS193对辣椒疫病的生防作用及其抗菌机制初探

摘要

由辣椒疫霉菌（Phytophthora capsici）侵染引起的辣椒疫病，是辣椒生产上的重要病害之一，广泛分布于世界各辣椒主产区。目前，在生产上控制辣椒疫病最易行且见效快的方法是施用化学药剂，但长期施用药剂使病原菌易产生一定抗药性，且农药残留问题突出，故寻找高效且不污染环境的方法对防治辣椒疫病具有重要意义，其中拥有广泛前景的方法是利用生防菌进行生物防治。本研究利用实验室早期分离获得一株具有生防作用的枯草芽孢杆菌BS193为材料，以辣椒疫病为对象，研究该菌株抗菌谱、生防作用及其抗菌机制，为辣椒疫病的生物防治和该生防菌的深入开发应用提供实践依据。得出如下结论：
　　1、枯草芽孢杆菌BS193的抗菌作用具有广谱性。以平板对峙法对枯草芽孢杆菌BS193的抗菌谱进行测定，结果表明，枯草芽孢杆菌BS193对9个属10种常见的植物病原菌均有抑制作用。
　　2、枯草芽孢杆菌BS193对辣椒疫病具有良好的生防效果。在平板对峙试验中，结果显示出菌株BS193对4种辣椒疫霉菌小种抑制作用稳定；在离体抑菌实验中，表明经BS193发酵液处理后抑制辣椒疫霉菌侵染叶片，其防效达到63.50％；在室内盆栽防病试验中，结果表明BS193菌体、无菌滤液、发酵液原液处理后24 h接种病原菌，9 d后各处理的防治效果分别为：30.75%、29.76%、52.56%；BS193发酵液、100倍稀释液、1000倍稀释液处理辣椒苗，接种病原菌9 d后的防效为：52.56%、34.56%、23.53%；BS193发酵液灌根后间隔0、24、48、72 h后接种病原菌，9 d后各处理的防治效果分别为：23.43%、41.25%、49.41%、51.44%。由此可知，枯草芽孢杆菌BS193对辣椒疫病的防病效果良好。同时，试验中发现BS193发酵液对辣椒幼苗还具有很好的促生作用。用BS193发酵液灌根30 d后测量发现，与对照组相比，辣椒苗株高、根长、鲜重和干重分别增加：50.04%、48.16%、73.27%和48.83%。
　　3、枯草芽孢杆菌BS193无菌滤液对辣椒疫霉菌菌丝生长、孢子囊形成、游动孢子萌发等具有显著的抑制活性。试验结果表明经菌株BS193无菌滤液处理后菌丝生长速率显著下降，在光学和电子显微镜下观察到菌丝分枝增多、畸形膨大、扭曲变形、皱缩等；辣椒疫霉孢子囊和游动孢子萌发的数量均明显减少，其抑制率都显著上升。
　　4、初步鉴定BS193所合成的抗菌物质：采用浓盐酸沉淀法粗提抗菌物质，检测抑菌活性并进行ULPC-QTOF/MS分析。试验结果显示抗菌粗提物对辣椒疫霉菌菌丝生长抑制效果显著；经ULPC-QTOF/MS分析出现多处明显的质谱响应峰，核质比m/z值比较，初步鉴定抗菌粗提物中含有Iturin（伊枯草菌素）、Feycin（丰原菌素）、Surfactin（表面活性素）这3类脂肽类抗菌物质。

目录

声明

1. 引言

1.1 辣椒疫病及防治研究进展

1.2 生物防治研究进展

1.3 枯草芽孢杆菌的研究进展

1.4 研究目的与意义

2. 材料与方法

2.1 试验材料

2.2 枯草芽孢杆菌BS193抗菌谱的测定

2.3 枯草芽孢杆菌BS193对辣椒疫病生防效果的测定

2.4 枯草芽孢杆菌BS193对辣椒疫霉菌的抗菌机制

2.5 枯草芽孢杆菌BS193抗菌物质的初步分离及鉴定

3. 结果与分析

3.1 枯草芽孢杆菌BS193抗菌谱的测定

3.2 枯草芽孢杆菌BS193对辣椒疫病生防效果的测定

3.3 枯草芽孢杆菌BS193的抗菌机制研究

3.4 枯草芽孢杆菌BS193抗菌物质的初步分离及鉴定

4. 结论与讨论

4.1枯草芽孢杆菌BS193具有广泛的抗菌活性

4.2 枯草芽孢杆菌BS193对辣椒疫病具有良好的生防效果

4.3 初步解析了枯草芽孢杆菌BS193的抗菌机制

4.4 初步分离及鉴定了枯草芽孢杆菌BS193的抗菌物质

参考文献

附录

致谢