声明
第一章 前言
1.1. 植物病毒经介体昆虫水平传播的机制
1.1.1. 非持久传播型和半持久传播型植物病毒的虫传机制
1.1.2. 持久传播型植物病毒的虫传机制
1.2. 植物病毒在介体昆虫中垂直传播的机制
1.2.1. 植物病毒在介体昆虫中经母本传播的机制
1.2.2. 植物病毒在介体昆虫中经父本传播的机制
1.3. 卵黄原蛋白
1.3.1. 概述
1.3.2. 昆虫卵黄原蛋白的结构特征
1.3.3. 卵黄原蛋白的合成、运输与调控
1.3.4. 昆虫卵黄原蛋白的功能
1.4. 昆虫共生菌
1.4.1. 概述
1.4.2. 共生菌在昆虫中的分布
1.4.3. 共生菌的功能
1.4.4. 共生菌的垂直传播机制
1.4.5. 叶蝉体内的共生菌
1.5. 水稻矮缩病毒
1.5.1. 水稻矮缩病的病害特征、发生和危害
1.5.2. 寄主范围与传播介体
1.5.3. 水稻矮缩病毒的病毒粒体结构、基因组及编码蛋白功能
1.5.4. 水稻矮缩病毒的虫传机制研究进展
1.6 本研究的目的和意义
第二章 叶蝉内生菌介导的RDV经卵传播机制研究
2.1. 材料与试剂：
2.1.1. 水稻病毒毒源
2.1.2. 供试昆虫
2.1.3. 试剂与抗体
2.2. 试验方法
2.2.2. 荧光原位杂交（Fluorescence in situ hybridization, FISH）检测 Sulcia 和
2.2.3. FISH检测Sulcia和Nasuia在黑尾叶蝉卵巢中的分布
2.2.4. RT-qPCR 检测检测在黑尾叶蝉不同性别以及发育不同时期 Sulcia 和Nasuia的含量
2.2.5. 黑尾叶蝉卵巢常温电镜样品制备
2.2.6. 提纯RDV病毒抗体IgG
2.2.8. 免疫荧光和FISH标记黑尾叶蝉卵巢中的Sulcia，Nasuia和RDV
2.2.10.构建酵母双杂交载体：
2.2.11. GST-Pull Down验证互作蛋白
2.2.12. Nasuia Porin抗体制备
2.2.13. Western blot检测抗体
2.2.14. RDV病毒提纯
2.2.16. RT-qPCR检测
2.2.17. RT-PCR检测虫卵带毒率
2.3. 结果与分析
2.3.1. 黑尾叶蝉卵巢
2.3.2. Sulcia和Nasuia在黑尾叶蝉体内的分布，
2.3.3. Sulcia和Nasuia不同发育阶段的含量变化
2.3.4. Sulcia和Nasuia在黑尾叶蝉的垂直传播路径
2.3.5. 电镜观察Sulcia和Nasuia入卵过程
2.3.6. RDV伴随着Sulcia和Nasuia入卵
2.3.7. 电镜观察RDV在Sulcia和Nasuia上的分布：
2.3.8. RDV采取不同的策略与Nasuia和Sulcia互作
2.3.9. 抑制RDV P8与Nasuia Porin互作可以降低RDV的经卵传播效率
2.4. 讨论
第三章 Nasuia携带Vg入卵
3.1. 材料与试剂：
3.1.1. 供试昆虫
3.1.2. 试剂与抗体
3.2. 试验方法
3.2.3. 免疫荧光标记Vg在黑尾叶蝉卵巢中的分布
3.2.4. RT-qPCR 检测检测在黑尾叶蝉不同性别以及发育不同时期 Sulcia 和
3.2.5. 免疫荧光和FISH标记黑尾叶蝉卵巢Sulcia，Nasuia和Vg
3.2.6. Western blot
3.2.7. 常温电镜样品制备
3.2.8. 免疫电镜样品制备
3.2.9. 免疫胶体金标记
3.2.10.酵母双杂交验证Vg和Nasuia Porin互作
3.2.11. GST-Pull Down验证互作蛋白
3.2.12.中和抗体实验
3.2.13.双链RNA的合成与纯化
3.2.14.通过RNAi抑制Ncprp和VgR表达
3.2.15. RNAi后对昆虫存活率以及产卵的影响
3.2.16. RT-qPCR检测
3.3. 结果与分析
3.3.1. 黑尾叶蝉中Vg序列分析：
3.3.2. 黑尾叶蝉中Vg的时空表达：
3.3.3. 黑尾叶蝉中Vg表达后的加工
3.3.4. 黑尾叶蝉中Vg输送入卵途径以及在卵内的积累
3.3.5. 入卵过程中Vg和Nasuia共定位
3.3.6. 电镜观察Vg在Nasuia上的分布：
3.3.7. Vg与Nasuia存在特异性互作
3.3.8. 抑制Nasuia和Vg间互作可以显著降低Nasuia和Vg在血淋巴的共定位
3.3.9. Ncprp特异性的调控Nasuia增殖
3.3.10.抑制Ncprp表达降低Nasuia和Vg的入卵效率
3.3.11.干扰VgR对Nasuia和Vg的入卵没有影响
3.3.12. Nasuia携带Vg入卵在叶蝉中广泛存在
3.3.13. Nasuia同时携带RDV和Vg入卵
3.4. 讨论
全文总结与展望
参考文献
附录
致谢
攻读博士期间的学术论文和研究成果
