汉防己甲素等四种抗纤维化药物对离体兔角膜基质细胞抑制作用的实验研究

摘要

本文运用离体兔角膜基质细胞从汉防己甲素等四种抗纤维化药物中筛选出抑制作用最佳的药物，然后初步探讨其对角膜基质细胞的作用机理及对纤维连接蛋白的影响，力图寻找一种能替代皮质类固醇用于防治屈光术后Haze形成的药物。方法1、选用原代及传代兔角膜基质细胞，实验组分别加入含不同浓度汉防己甲素、TGF-β抗体、α-2b干扰素、维拉帕米、氟美童的培养液，对照组加入等量空白培养液，分别培养24h、48h、72 h后，采用MTT法检测其对细胞增殖的抑制作用，计算出抑制率和IC50，并对其进行比较，选出抑制作用最佳的药物。2、运用流式细胞仪测定细胞周期和凋亡率的变化；电镜观察其超微结构变化；免疫细胞化学检测其凋亡指标的改变。3、将所选药物作用基质细胞后，运用免疫细胞化学和酶联免疫吸附法检测纤维连接蛋白的变化。研究表明：1、四种抗纤维化药物中，汉防己甲素对离体兔角膜基质细胞增殖的抑制作用最强，TGF-β抗体次之，均强于氟美童，α-2b干扰素作用较弱，而维拉帕米作用不明显。2、汉防己甲素可能是通过诱导细胞凋亡和使细胞周期停滞在G0/G1期，而发挥其抗增殖作用。3、汉防己甲素能减少纤维连接蛋白在兔角膜基质细胞间的堆积。

目录

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符号说明

前言

第一部分比较四种抗纤维化药物对离体兔角膜基质细胞的抑制作用----筛选出最佳药物

材料与方法

结果

讨论

小结

第二部分汉防己甲素对离体兔角膜基质细胞的作用机理及其对纤维连接蛋白的影响

材料与方法

结果

讨论

小结

全文结论

附图1

附图2

参考文献

文献综述PRK术后Haze发病机制及防治的研究进展

致谢

攻读硕士学位期间发表的文章