钙蛋白酶在TTX心脏停搏液对离体鼠心保护中的表达及意义

摘要

目的：研究钙蛋白酶在Na+通道阻滞剂河豚毒素(TTX)心脏停搏液对离体鼠心保护中的表达及意义。 方法：20只Wistar大鼠随机均分入实验组(TTX组)和对照组(STH-2组)。建立离体鼠心Langendorff和Neely灌注模型，搏动稳定后灌注30min，然后两组分别使用TTX心脏停搏液和STH-2心脏停搏液停搏，将心脏保存于4℃并维持60 min,复灌60min后结束实验，取缺血再灌注后的大鼠左心室心肌标本保存于-80℃冰箱备用。通过免疫组化和蛋白印迹(WB)等方法检测两组左心室心肌中钙蛋白酶和钙蛋白酶底物蛋白(结蛋白)的分布情况及表达量的变化，对钙蛋白酶和结蛋白表达量的关系进行相关性分析。 同时还观察了各组鼠心停搏复搏的情况，并对心率(HR)、冠脉流量(CAF)、左心室收缩末期压力(LVESP)和左心室最大压力变化速率(±dp/dt)等心功能指标的恢复率进行测定，以观察两组间心功能的变化。 结果：免疫组化显示钙蛋白酶在TTX组分布紊乱程度较轻，染色区域面积较小，表达量为0.0721±0.0040，明显低于STH-2组的0.1476±0.0050(P＜0.01)，提示TTX组中钙蛋白酶表达下降。TTX组结蛋白分布及排列较STH-2组整齐规则，表达量为0.0509±0.0039，明显高于STH-2组的0.0354±0.0034(P＜0.01)，提示TTX组中结蛋白破坏较少。 WB显示 TTX组钙蛋白酶表达量为0.4879±0.0195，明显低于STH-2组的0.7093±0.0349(P＜0.01);TTX组结蛋白表达量为1.1422±0.0362，明显高于STH-2组的0.7648±0.0215(P＜0.01)。对钙蛋白酶和结蛋白的表达量关系进行相关性分析，相关系数为-0.911(TTX组)、-0.817(STH-2组)，呈负相关，提示随着钙蛋白酶表达量的增加结蛋白表达量减少。 停搏前，两组心功能指标差异无统计学意义；恢复灌注后，TTX组的各项心功能恢复率明显优于STH-2组；TTX组心脏停搏和复搏速率均明显优于STH-2组。 结论：钙蛋白酶在TTX心脏停搏液对离体大鼠心脏保护作用中表达下降；结蛋白的表达增加；两者之间呈负相关。提示在TTX心脏停搏液对离体鼠心保护中，钙蛋白酶激活减少可能使得结蛋白等心肌细胞骨架蛋白损伤减轻。

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文摘

英文文摘

论文说明：英汉缩略语名词对照表

声明

前言

1材料与方法

2结果

3讨论

结论

参考文献

附图

文献综述：钙蛋白酶系统与心抽缺血再灌注损伤

致谢

攻读硕士硕士学位期间发表的学术论文