维持性血液透析患者血浆钙浓度对体内炎症介质的影响及机制研究

摘要

目的: 脉搏波速是能准确反映动脉粥样硬化程度的早期指标，能够综合反映各种危险因素对血管的损伤，探讨维持性血液透析（MHD）患者血浆钙浓度对体内炎症介质及脉搏波速的影响，进一步了解导致MHD患者心血管并发症的危险因素，防治并发症的发生发展。 方法: 1. MHD患者63例分成两组（A组和B组），A组31例为血浆钙浓度正常范围的患者，B组32例为血浆钙浓度低于正常范围的患者，透析前空腹留血3ml，乙二胺四乙酸（EDTA）抗凝，1500rpm离心10min，收集血浆，置-20℃冰箱保存待测。 2.由我院生化室检测肾功，肝功，血脂及血浆钙浓度；采用酶联免疫吸附实验（ELISA）检测C反应蛋白（CRP）、白介素6（IL-6）、总同型半胱氨酸（tHcy）、全段甲状旁腺素（iPTH）水平； 3.采用脉搏波传导速度（PWV）分析仪测定颈股脉搏波传导速度（CF-PWV）； 4.应用SPSS13.0统计软件包处理数据，计量资料以（x±S）表示，分类变量间比较进行卡方检验，采用两均数比较的t检验，直线相关分析，多元线性回归分析，多元Logistic回归分析。P<0.05为统计学差异有显著性。 结果: 1. A组CRP、IL-6、tHcy、iPTH、及CF-PWV明显低于B组（P<0.05）； 2.63例患者用直线相关分析表明MHD患者血浆钙浓度与CRP、IL-6、tHcy、iPTH及CF-PWV呈负相关关系； 3.分别以CRP、tHcy和IL-6为应变量，血钙、血肌酐、血清白蛋白、血胆固醇、甘油三酯及透析龄为自变量进行多元回归分析，血钙及透析龄进入CRP和tHcy的回归方程，说明血钙浓度高低及透析龄长短与CRP和tHcy水平相关，透析龄进入IL-6的回归方程，说明透析龄长短与IL-6水平相关； 4.以CF-PWV为应变量，透析龄、血钙、CRP、IL-6、tHcy、iPTH为自变量进行多元回归分析，透析龄、血钙、CRP、tHcy进入回归方程，说明透析龄、血钙浓度、CRP及tHcy水平与CF-PWV相关； 5.以CF-PWV增快（CF-PWV≧9.8m/s，中位数）将63例患者分为两组并以它为应变量，性别、年龄、吸烟、糖尿病、收缩压、舒张压、透析龄、血钙、CRP、IL-6、tHcy和iPTH为自变量进行多元逐步Logistic回归分析，透析龄，血钙及tHcy进入了回归方程，说明透析龄、血钙浓度及tHcy水平与CF-PWV增快有关。 结论: 1. MHD患者血浆钙浓度降低与炎症介质CRP及tHcy水平升高密切相关； 2.除透析龄外，血钙及tHcy是影响颈股脉搏波传导速度的独立危险因素。 目的: 在临床观察结果基础上，进一步探讨不同的钙离子浓度对MHD患者外周血单个核细胞（PBMC）炎症介质及细胞内蛋白激酶C（PKC）、核转录因子-κB（NF-κB）的影响。 方法: 1.健康志愿者和MHD患者各6例，取外周静脉血分离获得外周血单个核细胞，单个核细胞以5×105个细胞/孔种入96孔细胞培养板，分5组，分别加入不同浓度的氯化钙。A组：健康志愿者PBMC；B组：MHD患者PBMC；C组：MHD患者PBMC+1.0mmol/LCaCL2；D组：MHD患者PBMC+1.25mmol/LCaCL2，E组：MHD患者PBMC+1.5mmol/LCaCL2，培养细胞12小时。 2.观察培养前后细胞形态变化； 3.收集各组细胞培养上清检测CRP及IL-6水平，收获细胞后分别检测胞内钙离子浓度、PKC及NF-κB。 结果: 1.各组细胞培养前后细胞形态、数量无明显变化； 2.各组细胞培养前后胞内钙离子浓度差异无显著性； 3.健康者与未加氯化钙培养的细胞，培养上清中CRP、IL-6水平及PKC、NF-κB含量无明显差异； 4.加入1.0mmol/LCaCL2组细胞培养12小时后CRP、IL-6水平及PKC、NF-κB含量明显低于1.5mmol/LCaCL2组。 结论: 1.不同浓度的氯化钙不影响MHD患者PBMC的形态和数量； 2.不同浓度的氯化钙对MHD患者PBMC胞内钙离子浓度无明显影响； 3.不同浓度的氯化钙不影响健康者和MHD患者PBMC培养上清CRP、IL-6的水平及胞内PKC、NF-κB的含量； 4.低浓度钙明显抑制MHD患者PBMC培养上清CRP及IL-6的生成，明显减少胞内PKC及NF-κB的含量。 目的: MHD患者体内存在多种炎症介质，对患者的PBMC产生炎症因子有一定影响。本部分实验拟进一步探讨在炎症介质刺激下，不同浓度的氯化钙对MHD患者PBMC炎症因子的产生及细胞内PKC、NF-κB的影响。 方法: 1.健康志愿者和MHD患者各6例，取外周静脉血分离获得PBMC，PBMC以5×105个细胞/孔种入96孔细胞培养板，每孔均加入LPS，其终浓度为100ng/ml，分5组。A1组：正常人PBMC；B1组：患者PBMC；C1组：患者PBMC+1.0mmol/LCaCL2；D1组：患者PBMC+1.25mmol/LCaCL2；E1组：患者PBMC+1.5mmol/LCaCL2；培养12小时。 2.观察培养前后细胞形态变化； 3.收集各组细胞培养上清检测CRP及IL-6水平，收获细胞后分别检测胞内钙离子浓度、PKC及NF-κB。 结果: 1.各组细胞培养前后细胞形态、数量无明显变化； 2.各组细胞培养前后，细胞内钙离子浓度差异无显著性； 3.健康者与MHD患者未加氯化钙培养的PBMC，培养上清中CRP、IL-6水平及PKC、NF-κB含量无明显差异； 4.加入1.0mmol/LCaCL2组细胞培养12小时后，细胞产生CRP、IL-6及细胞内PKC、NF-κB含量明显高于1.5mmol/LCaCL2组。 结论: 1.在LPS的刺激下，不同浓度的氯化钙不影响培养的MHD患者PBMC形态和数量； 2.三种浓度的氯化钙对LPS刺激培养的MHD患者PBMC胞内钙离子浓度无明显影响（均P>0.05）； 3.在LPS的刺激下，不同浓度的氯化钙不影响健康者和MHD患者PBMC培养上清CRP、IL-6的水平及胞内PKC、NF-κB的含量； 4.在LPS的刺激下，低浓度钙明显增加MHD患者PBMC培养上清CRP、IL-6的生成及胞内PKC及NF-κB的含量。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：符号说明

声明

前言

第一部分 维持性血液透析患者血浆钙浓度对体内炎症介质及脉搏波速的影响

前言

1研究对象

2研究方法

3结果

4讨论

参考文献

第二部分 不同浓度的氯化钙对MHD患者单个核细胞分泌炎症介质及PKC,NF-κB的影响

前言

1材料

2方法

3结果

4讨论

参考文献

第三部分 脂多糖和氯化钙对MHD患者单个核细胞炎症介质产生及PKC,NF-κB水平的影响

前言

1材料和方法

2结果

3讨论

参考文献

全文小结

文献综述1 高Hcy对动脉粥样硬化形成的作用

文献综述2 缺氧诱导因子有间质纤维化研究进展

致谢

攻读学位期间发表的学术论文